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为探讨两对交叉引物PCR（PCR—CTPP）技术的原理并提高SNP分型的准确性，以人类MTHFR基因1298位点突变为例，通过设计合理的引物、优化引物终浓度及复性温度等重建PCR—CTPP检测系统，对比常规PCR—CTPP和改良的PCR-CTPP检测系统的可靠性。结果表明，改良的PCR-CTPP检测系统更加准确，支持了常规方法存在理论缺陷的观点；批量鉴定结果进一步验证了改良方法的可靠性。该技术有望在医学和分子生物学等领域广泛应用。