【摘 要】
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目的 探讨应激激素肾上腺素(EPI)对人肝癌细胞生长的影响及其作用机制.方法 采用噻唑蓝(MTT)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot等方法,分析EPI对人肝癌HepG2和MHCC97H细胞生长的影响,与α1-/β2-肾上腺素受体(α1-/β2-ARs)、腺苷环化酶/蛋白激酶A(AC/PKA)、促分裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶1/2(MAPK/ERK1/2)和磷
【机 构】
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210006,南京医科大学附属南京第一医院普外科,西安交通大学医学院第二附属医院普外科,210006,南京医科大学附属南京第一医院普外科,210006,南京医科大学附属南京第一医院普外科,210006
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目的 探讨应激激素肾上腺素(EPI)对人肝癌细胞生长的影响及其作用机制.方法 采用噻唑蓝(MTT)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot等方法,分析EPI对人肝癌HepG2和MHCC97H细胞生长的影响,与α1-/β2-肾上腺素受体(α1-/β2-ARs)、腺苷环化酶/蛋白激酶A(AC/PKA)、促分裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶1/2(MAPK/ERK1/2)和磷脂酸激醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT/PKB)的关系.结果癌细胞增殖与EPI的作用呈剂量和时间依赖关系(P<0.05),10μmol/L EPI作用24～48 h时其增殖能力最强[HepG2/(215±4)%和MHCC97H/(207±10)%],而正常肝细胞L-02的变化不明显(P>0.05).在HepG2和MHCC97H细胞中,α1-AR蛋白表达仅为L-02的30%和34%,而β2-AR蛋白表达上升至331%和309%.β2-AR阻滞剂ICI 118551可抑制EPI的促增殖作用.β-AR激动剂异丙肾上腺素(ISO,10μmol/L)具有类似EPI的促进增殖作用,其作用可分别被ICI118551和MEK抑制剂U0126显著抑制,被PKA抑制剂H-89和PI3K抑制剂LY294002部分抑制.ISO孵育15 min～8 h,在HepG2中p-ERK1/2蛋白水平上升3.49/3.02倍,在MHCC97H中上升3.15/2.73倍,该作用可被ICI 118551和U0126所阻断.结论 人肝癌HepG2和MHCC97H细胞过表达β2-AR,EPI通过β2-AR激活ERK1/2依赖性和非依赖性信号通路促进癌细胞的生长,其中MAPK/ERK1/2信号通路可能起主要作用。
其他文献
目的 观察雷帕霉素（Rapamycin）对体外培养的人前列腺癌PC-3M-2134细胞增殖及凋亡的影响，探讨其机制。方法分别用不同浓度的雷帕霉素（100、200、400、800μg/L）对细胞进行干预后，采用噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖变化，流式细胞术检测细胞凋亡变化，Westernblot法检测凋亡相关蛋白bcl-2及hax表达的变化。结果雷帕霉素能明显抑制PC-3M-21M细胞的增殖活性
上消化道大出血是肝硬化门脉高压症(PHT)的严重并发症,也是患者致死的主要原因.贲门周围血管离断术是治疗该病的主要手段[1-2].术前如何获得患者门静脉系统侧支循环血管的详细分布,从而选择精细的手术方法是提高手术疗效,减少术后并发症和死亡率的重要因素.本研究旨在观察CT门静脉成像术(CT-PV)在肝硬化门脉高压症合并上消化道出血患者诊治中的应用,以期对门静脉高压症手术提供详尽的术前影像学资料,用于
本实验旨在观察犬骨髓间充质干细胞(MSCs)在搏动性剪切力作用下的细胞分化[1]. 一、材料与方法 1.实验动物:北京地区健康成年(3～4岁龄)雄性杂种犬3条(体质量15 g). 2.犬MSCs用流式细胞仪进行鉴定:选用CD45、CD105、CD34和CD90作为表型鉴定指标. 3.剪切力实验:将MSC滴加到支架腔内,连接到生物反应器上,剪切力(τ)的计算公式为τ＝4μQ/πr3.
目的 观察坎地沙坦(CAN)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响,并观察骨桥蛋白(OPN)与肾间质纤维化的关系及CAN干预对肾脏OPN表达的影响,探讨其在纤维化中的作用机制.方法 (1)36只成年雄性SD大鼠随机分为3组,每组12只:假手术组(Sham)、UUO模型组(UUO)、坎地沙坦治疗组(CAN).UUO模型组和CAN组大鼠行左侧输尿管结扎术,Sham组只游离左侧输尿管但不结扎.
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本研究旨在观察特异性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS-398对人胃肠道间质瘤(GIST)细胞株凋亡的影响. 一、材料与方法
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目的 观察术中高渗氯化钠羟乙摹淀粉40注射液(HSS40)对恶性肿瘤患者体内自然杀伤细胞(NK细胞)和血小板活化分子CD41影响.方法 将76例手术患者随机分两组:输血组(A组)38例、HSS40组(B组)38例.于麻醉前1 h、术后1、3、7 d抽取外周血,细胞检测仪检测CD56和CD41含量;以乳酸脱氢酶释放法检测NK细胞活性.结果 组间比较:CD56术后第3、7天B组高于A组,差异显著(25