【摘 要】
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目的:通过骨灵膏及其拆方制剂对骨关节炎(OA)软骨细胞凋亡及胞外基质降解作用的研究,探讨骨灵膏及其拆方制剂对骨关节炎的作用机制。方法:选用60只雌性SD大鼠随机分为骨灵膏
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目的:通过骨灵膏及其拆方制剂对骨关节炎(OA)软骨细胞凋亡及胞外基质降解作用的研究,探讨骨灵膏及其拆方制剂对骨关节炎的作用机制。方法:选用60只雌性SD大鼠随机分为骨灵膏、骨膏、灵膏、塞来昔布、模型及正常组6组,每组10只,采用冷固法建立骨关节炎模型,造模成功后,骨灵膏、骨膏、灵膏均按10.41 mL·kg-1·d-1(相当于生药量33.31 g·kg-1)灌胃,塞来昔布20.83 mg·kg-1·d-1灌胃,正常、模型组给予等量生理盐水灌胃,给药10周后,取大鼠膝关节软骨组织,分别以苏木精-伊红(HE)、番红-固绿(SA/FG)、番红-阿尔辛蓝(SA/AB)进行组织病理观察,根据改良的Mankin关节软骨病理评分标准进行分级评分,采用Western blot法检测基因153(CHOP/GADD153)蛋白的表达,通过荧光定量PCR检测软骨细胞B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),基质金属蛋白酶-3(MMP-3),基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)mRNA表达。结果:与正常组比较模型组能显著减低Bcl-2,TIMP-1 mRNA表达(P<0.01)及增加Bax,MMP-3 mRNA表达(P<0.01)。与模型组相比骨灵膏能明显下调ERS相关CHOP/GADD153蛋白的生成(P<0.01)、促进抑凋亡基因Bcl-2mRNA表达及降低促凋亡基因BaxmRNA表达(P<0.01),进而上调Bcl-2/bax,抑制软骨细胞的异常凋亡;同时,骨灵膏较模型组能显著降低MMP-3 mRNA的表达(P<0.01)、升高TIMP-1 mRNA的表达(P<0.01),降低MMP-3 mRNA/TIMP-1 mRNA。结论:骨灵膏可能通过降低ERS途径相关蛋白GADD153的异常生成,进一步调控相关凋亡靶基因的表达而抑制软骨细胞的异常凋亡和阻止细胞外基质异常降解而阻止OA关节软骨退行性变,保护了关节软骨,其作用明显优于其拆方制剂骨膏、灵膏。
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