【摘 要】
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禾本科植物木聚糖酶在其成熟过程中需在细胞进入程序性死亡后,经蛋白水解酶多次剪切方显活性,常规蛋白质克隆表达系统无法表达这类酶.通过GenBank搜索获得一与之同族、结构相
【基金项目】
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国家自然科学基金，江苏省自然科学基金，江苏省高校自然科学基金
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禾本科植物木聚糖酶在其成熟过程中需在细胞进入程序性死亡后,经蛋白水解酶多次剪切方显活性,常规蛋白质克隆表达系统无法表达这类酶.通过GenBank搜索获得一与之同族、结构相似的来源于T.reesei QM9414(ATCC26921)突变种PC-3-7菌株的xynⅢ.但该酶在T.reesei QM9414中不表达,而在基因组中存在.通过overlapPCR法将4个外显子分别克隆、测序,再连接测序,最终获得该基因的全长cDNA序列.将该基因连接到表达载体pETBlue-2上,并转化到Tuner DE3表达菌株
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