天蓝淡红链霉菌SIPI-1482中dnrX基因的敲除及多柔比星产生菌的构建

来源 :中国抗生素杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qingqing008800
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柔红霉索是合成重要抗肿瘤抗生素多柔比星的前体,由微生物发酵产生。通过PCR从国内柔红霉索生产菌种天蓝淡红链霉菌SIPI-1482基因组DNA中扩增出约1080bp的dnrX部分序列,将PCR扩增片段中985bp的片段亚克隆至大肠埃希菌质粒pYG813构建了同源重组突变质粒pYG963,转化SIPI-1482原生质体并成功地敲除了dnrX基因,得到一株稳定的突变株。该突变株的发酵试验表明dnrX基因所编码的酶的功能已经被有效地阻断,对酸敏感的副产物减少,柔红霉索的产量增加了近3倍,将原野生菌改造成为多柔比星
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