斑马鱼cdk7和cyclin H基因的原核表达及多克隆抗体的制备与鉴定

来源 :细胞生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yipan1975
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构建了两个表达斑马鱼cdk7(基因片段)和cyclin H(基因全长)的重组质粒,分别转化大肠杆菌BL21进行原核表达,所得的CDK7和cyclin H两个融合蛋白均以包涵体形式存在。经SDS-PAGE分离,切下含有目的蛋白条带的凝胶冻成千粉,分别免疫新西兰大耳兔,制备并纯化了分别抗CDK7和抗cyclin H的两个多克隆抗体。经酶联免疫吸附测定、蛋白质印迹分析检测,确定获得了两种具有较高效价的特异性多克隆抗体。免疫荧光组织化学结果显示,CDK7和cyclin H这两个蛋白质均普遍存在于斑马鱼胚胎动物极的
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