【摘 要】
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以卡门柏青霉-PG3为出发菌株,提取其总RNA,应用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）扩增出860bp左右的片段,核苷酸序列分析表明其与甘油单-双酰酯脂肪酶（MDGL）基因（mdlA）一致.将此基因克
【机 构】
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北京化工大学生命科学与技术学院,北京市生物加工过程重点实验室
【基金项目】
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北京市生物加工过程重点实验室开放项目（SYS100100421）
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以卡门柏青霉-PG3为出发菌株,提取其总RNA,应用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）扩增出860bp左右的片段,核苷酸序列分析表明其与甘油单-双酰酯脂肪酶（MDGL）基因（mdlA）一致.将此基因克隆到原核表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21（DE3）,经诱导后,重组的脂肪酶（rMDGL）在宿主菌中得到表达,表达量可达菌体总蛋白量的45.2%.重组蛋白包涵体溶解、复性后用Ni^2＋组氨酸结合树脂螯合层析柱纯化,聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）显示为单一区带,其相对分子质量为41 00
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