中华大蟾蜍重组Gal-3C的原核表达、纯化及抗血清制备

来源 :生命科学研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sfx158158
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
半乳糖凝集素-3(galectin-3,Gal-3)与肿瘤的发生发展密切相关,已有文献表明其羧基端galectin-3C(Gal-3C)具有一定的肿瘤抑制作用。为了获得Gal-3C的抗血清,实验以已有的重组质粒pGM-Gal-3为模板,利用PCR方法扩增中华大蟾蜍Gal-3C基因片段,并将其插入到表达载体pET28b上,构建中华大蟾蜍Gal-3C的原核表达载体pET28b-Gal-3C;将构建好的重组质粒pET28b-Gal-3C转入感受态细胞E.coli BL21(DE3)中,用IPTG诱导蛋白质表达,并通过SDS-PAGE和Western-blot检测目的蛋白Gal-3C的表达;以纯化的重组蛋白Gal-3C免疫小白鼠,制备鼠抗中华大蟾蜍Gal-3C的抗血清,用Western-blot检测抗血清的特异性及其效价。结果显示成功构建了中华大蟾蜍pET28b-Gal-3C重组质粒,并诱导得到了目的蛋白的表达,而且将表达产物免疫小鼠后获得了特异性良好的抗中华大蟾蜍Gal-3C的抗血清。以上结果为抗肿瘤药物的研究和发展奠定了基础。
其他文献
“创新是一个民族的灵魂,是一个国家兴旺发达的不竭动力。”一个民族要强盛不衰,必须增强全民创新意识,不断提高创新能力。而增强全民族整体的创新意识与能力,就应从学生开始抓起
化学是一门以实验为基础的学科,实验是初中化学学习的灵魂。它不仅激发了学生学习化学的兴趣,还培养了学生的动手能力和思维拓展能力。将重点阐述化学实验的重要性及如何强化
甘肃省敦煌市莫高窟藏经洞所出的我国中世纪文书,与唐代医药有关的医学写卷有30多个卷号。其中行散之法是汉代以来就有记载的辅助服药方法,有珍贵的临床指导作用。
为解决强化混凝法原位修复黑臭水体中易形成的二次污染和底泥负荷问题,通过模拟试验研究了新型碳素纤维(carbon fiber,CF)生态草填料协同曝气技术对强化混凝处理后的黑臭水体