【摘 要】
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利用PCR扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒的M基因,按正确的读码框与GP5基因串联,成功构建穿梭载体pShuttle-CMV-M-GP5,经PCR、测序鉴定正确.Pme Ⅰ线性化后在BJ5183大肠杆菌内与
【机 构】
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南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（No.30270990）,教育部博士点基金项目（No.20030307012）,新世纪优秀人才计划资助项目（NCET-04-0502）.
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利用PCR扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒的M基因,按正确的读码框与GP5基因串联,成功构建穿梭载体pShuttle-CMV-M-GP5,经PCR、测序鉴定正确.Pme Ⅰ线性化后在BJ5183大肠杆菌内与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组,产生重组腺病毒DNA.重组腺病毒DNA经Pac Ⅰ线性化后用脂质体转染HEK-293A细胞,在细胞内包装成完整的腺病毒,通过IFA可以检测到M与GP5串联的重组腺病毒构建成功,可以正确地表达目的蛋白.将构建好的重组腺病毒免疫小鼠,结果表明可以诱导产生较强的体液免疫应
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