微小隐孢子虫T7噬菌体展示文库的构建

来源 :中国人兽共患病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ylali001
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目的 为筛选微小隐孢子虫保护性抗原基因,构建了微小隐孢子虫T7噬菌体展示文库。方法 用Trizol试剂提取微小隐孢子虫总RNA,分离纯化mRNA,经反转录合成双链eDNA。在双链eDNA末端加上定向EcoR Ⅰ/Hind Ⅲ接头,用EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ消化接头,使形成两端分别带有EcoR 和Hind Ⅲ粘性末端的双链eDNA。经Mini Column纯化,收集400bp以上的双链eDNA片段,将其连接于带有EcoRⅠ和Hind Ⅲ末端的T7 Seleet 10~3b载体,经体外包装后,以BLT540
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