【摘 要】
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目的 研究烟草烟雾暴露和尼古丁刺激对大鼠肺动脉平滑肌电压依赖性钾通道蛋白Kv1.5和Kv2.1的mRNA表达的影响,探讨吸烟参与肺动脉高压疾病发生发展的机制.方法 采用随机数字表
【机 构】
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510120,呼吸疾病国家重点实验室(广州医学院)广州医学院第一附属医院广州呼吸疾病研究所
【基金项目】
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教育部长江学者创新团队;广东省科技攻关项目;国家自然科学基金
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目的 研究烟草烟雾暴露和尼古丁刺激对大鼠肺动脉平滑肌电压依赖性钾通道蛋白Kv1.5和Kv2.1的mRNA表达的影响,探讨吸烟参与肺动脉高压疾病发生发展的机制.方法 采用随机数字表法将36只雄性SD大鼠分为6组,每组6只:(1)对照1个月组；(2)对照3个月组；(3)对照6个月组；(4)烟雾暴露1个月组；(5)烟雾暴露3个月组；(6)烟雾暴露6个月组.采用直接有心测压法、HE染色及实时荧光定量PCR分别检测烟雾暴露1个月、3个月及6个月对大鼠右心室收缩压(RVSP)及平均压(mPAP)、有心室肥厚指数[RV/(LV +S)]及肺动脉平滑肌组织Kv1.5和Kv2.1的mRNA表达的影响.采用原代细胞培养,胶原酶消化法分离、培养大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC),尼古丁(终浓度100 nmol/L)处理48 h后,应用实时荧光定量PCR法检测Kv1.5和Kv2.1的mRNA表达,并与对照组进行比较.结果 烟雾暴露6个月组大鼠右心室平均血压和右心室收缩压分别为(13.1±0.6)mm Hg(1 mm Hg =0.133 kPa)、(29.7±0.8)mm Hg,略高于对照6个月组[(10.2±0.4) mmHg、(22.6±0.6) mm Hg(P＜0.01)].烟雾暴露各组与其各自对照组相比大鼠PASMC的Kv1.5 mRNA相对表达量分别为(52±11)％、(64±19)％和(75±11)％(均P＜0.05)；烟雾暴露各组与其各自对照组相比大鼠PASMC的Kv2.1 mRNA的相对表达量分别为(51.0±18.6)％、(78.7±10.1)％和(71.4±2.3)％(P＜0.01).浓度为100 nmol/L尼古丁刺激大鼠PASMC 48 h后Kv1.5和Kv2.1 mRNA的相对表达量降低,对照组Kv1.5和Kv2.1 mRNA的相对表达量分别为[(67±14)％,P＜0.05]和[(72±15)％,P＜0.01].结论 烟草烟雾暴露可能通过尼古丁抑制大鼠肺动脉平滑肌Kv1.5、Kv2.1 mRNA的表达参与肺动脉高压的发生发展.
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