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【摘 要】目的：通过与梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）的比较，评价其他不同梅毒检测方法的符合率。 方法：用TP-ELISA法检测3220人份标本，将阳性88例血清标本分别用梅毒螺旋体血凝试验（TPHA），梅毒螺旋体特异抗体凝集试验（TPPA）法进行复检比较。结果：TPHA与TP-ELISA符合率为93.18（82/88）%；TPPA与TP-ELISA符合率为93.18（82/88）%；TPHA与TPPA符合率100%（82/82）。结论：ELISA法方法简便、经济，可实现操作自动化、客观化，便于质量控制，但假阳性率高，只可用来初筛梅毒，不能作为梅毒确认试验。TPHA与TPPA两种方法都不能实现操作自动化，不便于质量控制和结果储存，但符合率高，可作为梅毒确认试验方法。
【关键词】梅毒；梅毒酶联免疫吸附试验；梅毒螺旋体血凝试验；梅毒螺旋体特异抗体凝集试验；符合率
【文章编号】1004-7484（2014）06-3526-01
近年来，我国梅毒发病率有居高不下趋势，梅毒血清学检验已列入献血员、临床患者输血前后、孕妇、公务员体检及各种创伤性疾病检查前常规检测项目[1]。我院为公务员体检单位，选择比较恰当的检测方法对公务员进行体检至关重要，检测梅毒的方法有十多种，为探讨梅毒检测有一个好的组合方法，我们将TP-ELISA法筛选出的88例阳性标本，分别用梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）、梅毒螺旋体特异抗体凝集试验（TPPA）两种不同方法进行复检比较，评价这三种检测方法的符合程度，进行检测方法组合，现报告如下。
1 对象和方法
1.1 研究对象 收集我院2013年门诊、体检中心和病房送检的经TP-ELISA检测3220人中阳性标本88份作为检测评价对象。
1.2 材料和方法
1.2.1 试剂和仪器 试剂TP-ELISA试剂盒为北京万泰生物药业股份有限公司产品，TP-TPHA试剂盒为美国美德科学技术公司产品，TP-TPPA试剂盒为日本富士株式会社产品。仪器DNM-9602全自动酶标分析仪由北京普朗新技术有限公司生产，全自动快速立式洗板机由郑州基波新科技技术有限公司生产，ESCD-CLASSIIBSC生物安全柜由新加坡生产。
1.2.2 方法 试验方法采取空腹静脉血3-4ml，分离血清。试验中设计阳性对照、阴性对照、空白对照，同步进行各项目室内质控物监测，TP-ELISA、TPHA、TPPA的检测均严格按使用说明书操作。
2 结果
3 讨论
3.1梅毒是由苍白螺旋体引起的一种性传播疾病。梅毒螺旋体是引起人类梅毒的病原体，人是梅毒的唯一传染源。梅毒有先天性和获得型两种，其传播途径有三种，先天性梅毒螺旋体通过胎盘由母体传染胎儿，获得性梅毒主要经性接触和血液传播，输血感染是血液传播的方式之一。近年来，我国梅毒的发病人数呈急剧上升趋势[2]，严重危害了人类和社会的健康。梅毒的防治主要在于早发现、早诊断和早治疗。因此选择敏感性及特异性均高、快速的梅毒检测方法至关重要。
3.2现阶段实验室检测梅毒的方法有病原学、血清学、基因诊断和脑脊液检查。其中病原学检查方法可靠，但易受条件制约，适于科研或教学使用；血清学检查方法分非特异性抗体检测试验和特异性抗體检测试验，前者方法简便，适于早期筛查，后者敏感性强、特异度高，现为梅毒诊断的标准实验方法，荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS），是所有螺旋体试验中最敏感的方法，特异性也很高，被认为是检测梅毒的“金标准”，缺点是不适合疗效观察，且价格昂贵；基因诊断为新检测手段，具有高灵敏度，但目前国内试剂质量有待改进；脑脊液检查取样技术较难，病人难以接受，送检率低[3]。
3.3梅毒检测分病原学检测、非特异性梅毒血清学试验和特异性梅毒血清学试验等。梅毒的病原学检测有暗视野显微镜检查法、镀银染色法、直接免疫荧光法（DFA）、聚合酶链反应（PCR）等。目前最常用的检测方法仍是血清学检测，多为非特异性抗体与特异性抗体联合检测[4]。梅毒非特异性抗体实验：可用性病研究实验室试验（VDRL）、不加热血清反应素试验（USR）、梅毒甲苯胺红不加热血清学试验（TRUST）、快速血浆反应素试验（RPR）等检测。梅毒特异性抗体实验：可用荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）、梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）、梅毒酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）、梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）、梅毒快速诊断试验（TP-RT）、梅毒螺旋体化学发光免疫测定（TP-CLIA）、梅毒螺旋体抗体免疫印迹试验等检测。尽管检测方法多样，不同的检测方法对于梅毒都有其特殊的临床诊断价值，但也有其自身局限性。任华爱等[5] 研究表明在梅毒感染的不同时期TRUST 检出率差别较大。RPR试验在抗体含量过高时，易出现假阴性反应，即前带现象（prozone phenomenon），RPR试验亦存在生物学假阳性反应[6]；TP-ELISA 法优点是可以直接检测抗梅毒特异抗体IgM，IgG，能对抗体分型，能提示梅毒感染的各阶段，具有高特异性和高敏感性，对诊断治疗均有益处，缺点是敏感性过高，容易误诊疾病，在患者血清中梅毒特异性抗体低于其试剂检测限时，就有可能出现假阴性，同时该法也存在着假阳性[7]；TPPA试剂价格较高，检测时需要将标本倍比稀释，不利于大批量样本检测，且以肉眼判断结果，原始数据无法保存 [8]；TPHA试剂价格比较高， 不利于大批量样本检测，且以肉眼判断结果，原始数据无法保存， 不便于质量控制。
3.4国家公务员局规定，把TPHA作为公务员体检方法，我们通过三种方法进行实验比对，TP-ELISA法只能作为筛查试验，TPHA、TPPA法联合检测可作为诊断梅毒的确认试验。联合检测可为临床提供准确、及时的诊断依据，可避免误诊、漏诊而产生医患纠纷；联合检测还可为预防控制梅毒提供依据，也可为临床诊断梅毒提供可靠诊断数据。
参考文献：
[1] 赵成桂， 吴国球， 孙宏伟 现代医学 （ M odern M edical Journa l）， 2007年 10月， 第 35卷 第 5期
[2] 唐卫明、丁建平、闰红静等，中国大陆2001-2006年MSM的性行为特征与HIV现症梅毒感染现状的Meta分析〔J〕，中国艾滋病性病，2008，14（5）：471-474.
[3] 隗功浩，梅毒螺旋体实验室检测技术与及研究进展，职业与健康，2011，2（27）：202.
[4] 文海燕、张华荣、陈正明、郑义，梅毒检测方法的研究进展，中国皮肤性病学杂志，2012（26）365.
[5] 任爱华、唐西怀，三种梅毒血清学方法的比较，医学检验与临床杂志，2009，20（1）：74-75.
[6] 王福俊、王琳琳，梅毒螺旋体抗体ELISA测定方法的建立和利用〔J〕，上海医学检验杂志，2000，15（4）：218-219.
[7] 李丹、高伟等，血清中梅毒抗体检测的研究进展，内蒙古医学杂志，2010，3（42）：322.
[8] 马永娟、王彬、孟庆敏，梅毒四种血清学方法检测的比较，职业与健康，2010，15（26）：1719.
【关键词】梅毒；梅毒酶联免疫吸附试验；梅毒螺旋体血凝试验；梅毒螺旋体特异抗体凝集试验；符合率
【文章编号】1004-7484（2014）06-3526-01
近年来，我国梅毒发病率有居高不下趋势，梅毒血清学检验已列入献血员、临床患者输血前后、孕妇、公务员体检及各种创伤性疾病检查前常规检测项目[1]。我院为公务员体检单位，选择比较恰当的检测方法对公务员进行体检至关重要，检测梅毒的方法有十多种，为探讨梅毒检测有一个好的组合方法，我们将TP-ELISA法筛选出的88例阳性标本，分别用梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）、梅毒螺旋体特异抗体凝集试验（TPPA）两种不同方法进行复检比较，评价这三种检测方法的符合程度，进行检测方法组合，现报告如下。
1 对象和方法
1.1 研究对象 收集我院2013年门诊、体检中心和病房送检的经TP-ELISA检测3220人中阳性标本88份作为检测评价对象。
1.2 材料和方法
1.2.1 试剂和仪器 试剂TP-ELISA试剂盒为北京万泰生物药业股份有限公司产品，TP-TPHA试剂盒为美国美德科学技术公司产品，TP-TPPA试剂盒为日本富士株式会社产品。仪器DNM-9602全自动酶标分析仪由北京普朗新技术有限公司生产，全自动快速立式洗板机由郑州基波新科技技术有限公司生产，ESCD-CLASSIIBSC生物安全柜由新加坡生产。
1.2.2 方法 试验方法采取空腹静脉血3-4ml，分离血清。试验中设计阳性对照、阴性对照、空白对照，同步进行各项目室内质控物监测，TP-ELISA、TPHA、TPPA的检测均严格按使用说明书操作。
2 结果
3 讨论
3.1梅毒是由苍白螺旋体引起的一种性传播疾病。梅毒螺旋体是引起人类梅毒的病原体，人是梅毒的唯一传染源。梅毒有先天性和获得型两种，其传播途径有三种，先天性梅毒螺旋体通过胎盘由母体传染胎儿，获得性梅毒主要经性接触和血液传播，输血感染是血液传播的方式之一。近年来，我国梅毒的发病人数呈急剧上升趋势[2]，严重危害了人类和社会的健康。梅毒的防治主要在于早发现、早诊断和早治疗。因此选择敏感性及特异性均高、快速的梅毒检测方法至关重要。
3.2现阶段实验室检测梅毒的方法有病原学、血清学、基因诊断和脑脊液检查。其中病原学检查方法可靠，但易受条件制约，适于科研或教学使用；血清学检查方法分非特异性抗体检测试验和特异性抗體检测试验，前者方法简便，适于早期筛查，后者敏感性强、特异度高，现为梅毒诊断的标准实验方法，荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS），是所有螺旋体试验中最敏感的方法，特异性也很高，被认为是检测梅毒的“金标准”，缺点是不适合疗效观察，且价格昂贵；基因诊断为新检测手段，具有高灵敏度，但目前国内试剂质量有待改进；脑脊液检查取样技术较难，病人难以接受，送检率低[3]。
3.3梅毒检测分病原学检测、非特异性梅毒血清学试验和特异性梅毒血清学试验等。梅毒的病原学检测有暗视野显微镜检查法、镀银染色法、直接免疫荧光法（DFA）、聚合酶链反应（PCR）等。目前最常用的检测方法仍是血清学检测，多为非特异性抗体与特异性抗体联合检测[4]。梅毒非特异性抗体实验：可用性病研究实验室试验（VDRL）、不加热血清反应素试验（USR）、梅毒甲苯胺红不加热血清学试验（TRUST）、快速血浆反应素试验（RPR）等检测。梅毒特异性抗体实验：可用荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）、梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）、梅毒酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）、梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）、梅毒快速诊断试验（TP-RT）、梅毒螺旋体化学发光免疫测定（TP-CLIA）、梅毒螺旋体抗体免疫印迹试验等检测。尽管检测方法多样，不同的检测方法对于梅毒都有其特殊的临床诊断价值，但也有其自身局限性。任华爱等[5] 研究表明在梅毒感染的不同时期TRUST 检出率差别较大。RPR试验在抗体含量过高时，易出现假阴性反应，即前带现象（prozone phenomenon），RPR试验亦存在生物学假阳性反应[6]；TP-ELISA 法优点是可以直接检测抗梅毒特异抗体IgM，IgG，能对抗体分型，能提示梅毒感染的各阶段，具有高特异性和高敏感性，对诊断治疗均有益处，缺点是敏感性过高，容易误诊疾病，在患者血清中梅毒特异性抗体低于其试剂检测限时，就有可能出现假阴性，同时该法也存在着假阳性[7]；TPPA试剂价格较高，检测时需要将标本倍比稀释，不利于大批量样本检测，且以肉眼判断结果，原始数据无法保存 [8]；TPHA试剂价格比较高， 不利于大批量样本检测，且以肉眼判断结果，原始数据无法保存， 不便于质量控制。
3.4国家公务员局规定，把TPHA作为公务员体检方法，我们通过三种方法进行实验比对，TP-ELISA法只能作为筛查试验，TPHA、TPPA法联合检测可作为诊断梅毒的确认试验。联合检测可为临床提供准确、及时的诊断依据，可避免误诊、漏诊而产生医患纠纷；联合检测还可为预防控制梅毒提供依据，也可为临床诊断梅毒提供可靠诊断数据。
参考文献：
[1] 赵成桂， 吴国球， 孙宏伟 现代医学 （ M odern M edical Journa l）， 2007年 10月， 第 35卷 第 5期
[2] 唐卫明、丁建平、闰红静等，中国大陆2001-2006年MSM的性行为特征与HIV现症梅毒感染现状的Meta分析〔J〕，中国艾滋病性病，2008，14（5）：471-474.
[3] 隗功浩，梅毒螺旋体实验室检测技术与及研究进展，职业与健康，2011，2（27）：202.
[4] 文海燕、张华荣、陈正明、郑义，梅毒检测方法的研究进展，中国皮肤性病学杂志，2012（26）365.
[5] 任爱华、唐西怀，三种梅毒血清学方法的比较，医学检验与临床杂志，2009，20（1）：74-75.
[6] 王福俊、王琳琳，梅毒螺旋体抗体ELISA测定方法的建立和利用〔J〕，上海医学检验杂志，2000，15（4）：218-219.
[7] 李丹、高伟等，血清中梅毒抗体检测的研究进展，内蒙古医学杂志，2010，3（42）：322.
[8] 马永娟、王彬、孟庆敏，梅毒四种血清学方法检测的比较，职业与健康，2010，15（26）：1719.