【摘 要】
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首先获得绵羊胎儿成纤维细胞、成年耳组织成纤维细胞及前脂肪细胞,用脂质体介导法、BTX电转法及Nucleofector核转法对上述细胞系转染绿色荧光蛋白(gfp)基因,并对转染效率进行
【机 构】
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天津市畜牧兽医研究所,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
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首先获得绵羊胎儿成纤维细胞、成年耳组织成纤维细胞及前脂肪细胞,用脂质体介导法、BTX电转法及Nucleofector核转法对上述细胞系转染绿色荧光蛋白(gfp)基因,并对转染效率进行比较,最后探讨3种转gfp基因细胞对绵羊转基克隆胚发育的影响.结果:核转法的转基因效率最高,3种细胞的转基因效率分别为86％,87％和90％,显著高于BTX电转法和脂质体法基因转染效率；脂质体转染效率显著低于BTX电转效率(P＜0.05).而对同一种转染方法而言,基因转染效率在3种细胞间差异均不显著(P＞0.05).在以上述3种转基因细胞为核供体的转基因克隆试验中,胚胎融合率、卵裂率均无显著性差异(P＞0.05),胎儿成纤维细胞组的囊胚率显著高于前脂肪细胞组(P＜0.05),但耳组织成纤维细胞组与胎儿成纤维细胞、前脂肪细胞间差异均不显著(P＞0.05).结果表明核转法基因转染效率最高,胎儿成纤维细胞最适合于胚胎克隆研究.
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