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目的
探讨DNA识别受体环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)在成人T淋巴细胞白血病病毒1型(HTLV-1)感染HeLa细胞过程中的功能及其作用机制。
方法将HeLa细胞与MT2细胞(HTLV-1阳性T细胞)共培养，采用免疫印迹试验检测cGAS在HeLa细胞中的表达变化；构建带有血凝素(HA)标签的cGAS表达质粒，转染入HeLa细胞24 h后与MT2细胞共培养24 h，免疫印迹试验检测HeLa细胞中HTLV-1病毒蛋白Tax和p19的表达量，real-time PCR检测HeLa细胞中HTLV-1病毒基因Tax、p19、Env、HBZ以及px转录本的量，同时免疫印迹试验检测干扰素调节因子3(IRF3)和p65的磷酸化水平，real-time PCR检测干扰素(IFN)-β、干扰素诱导蛋白10(IP-10)、调节活化正常T细胞表达和趋化因子(RANTES)和肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达量。
结果与MT2细胞共培养后，HeLa细胞中cGAS的表达升高；转染有cGAS表达质粒的HeLa细胞与对照组细胞相比，在与MT2细胞共培养后，Tax和p19在蛋白水平上的表达量减少，Tax、p19、EnV、HBZ以及px转录本的量减少，IRF3和p65的磷酸化水平升高，IFN-β、IP-10、RANTES和TNF-α的表达量增加。
结论cGAS在HTLV-1感染的HeLa细胞中可能具有促进固有免疫应答并抑制HTLV-1病毒复制的功能。