【摘 要】
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目的建立简便、快速、准确、灵敏、特异的沙门菌检测方法。方法根据沙门菌argT基因序列设计通用引物和3＇、5＇均加有polyC的特异性探针。上游引物5＇标记生物素,将探针线性固定在
【机 构】
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重庆医科大学实验动物中心,重庆医科大学感染性疾病分子生物学重点实验室,重庆市卫生服务中心
【基金项目】
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重庆市科委科技创新能力建设项目《重庆市啮齿类实验动物工程技术研究中心》CSTC,2010CB5013, 科技部项目《重庆创新药物孵化基地实验动物服务平台》2010ZX09401-306-1-6
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目的建立简便、快速、准确、灵敏、特异的沙门菌检测方法。方法根据沙门菌argT基因序列设计通用引物和3＇、5＇均加有polyC的特异性探针。上游引物5＇标记生物素,将探针线性固定在硝酸纤维素膜上,使沙门菌PCR扩增产物与探针进行杂交,通过优化杂交条件,建立反向线性探针杂交检测方法。利用该方法对重庆地区74只实验动物进行检测,同时与传统分离培养方法比较。结果反向线性探针杂交方法灵敏度高,对沙门菌PCR扩增产物在3ng/μL以上可有效检测。从细菌分离培养及DNA提取到PCR扩增及反向杂交结束仅需27h。该检测方
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