通督调神针刺对帕金森病模型小鼠线粒体自噬水平和多巴胺含量的影响

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目的 探究通督调神针刺治疗帕金森病的机制。方法 将48只C57BL/6雄性小鼠,采用电脑随机数字法分为空白组12只,西药组12只,模型组12只,针刺组(通督调神针刺)12只。除空白组,其余三组腹腔注射1-甲基-4-苯基-1, 2, 3, 6-四氢吡啶(MPTP)复制帕金森病模型。针刺组进行“百会”“风府”“大椎”“筋缩”针刺治疗,西药组喂服多巴丝肼(美多芭)。分别在造模前、造模后和治疗后对各组小鼠进行自主活动计数、爬杆实验等行为学检测;6周后处死小鼠取脑组织使用Western blot检测中脑黑质中PINK1、Parkin蛋白表达量;实时荧光定量法(RT-PCR)检测各组大鼠中脑黑质中PINK1mRNA、ParkinmRNA相对表达量;HE染色观察中脑黑质组织形态学变化;免疫组化法检测中脑黑质TH的表达;ELISA法检测纹状体中多巴胺(DA)水平。结果 模型组小鼠造模后自主活动计数显著低于空白组(P<0.01),爬杆实验评分显著高于空白组(P<0.01);针刺组和西药组小鼠自主活动计数较模型组显著降低,爬杆试验评分较模型组显著升高(P<0.01);模型组中脑黑质中PINK1、ParkinP、INK1mRNA、ParkinmRNA表达量均显著低于空白组(P<0.01)。针刺组、西药组中脑黑质中PINK1、Parkin、PINK1mRNA、ParkinmRNA表达量均高于模型组(P<0.05),西药组中脑黑质中PINK1、Parkin、PINK1mRNA、ParkinmRNA表达量与针刺组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组相比,模型组中脑黑质多巴胺能神经元细胞形态不规则,体积增大,细胞间隙增宽,细胞核核仁不明显,神经纤维排列散乱,结构疏松。针刺组、西药组与模型组相比中脑黑质多巴胺能神经元细胞的形态较为规则,体积较正常,核仁较明显,神经纤维排列较整齐,结构较紧密。与空白组相比,模型组TH免疫反应阳性神经元数目明显减少(P<0.05),排列散乱,神经元胞体轮廓及突起不清晰。针刺组、西药组与模型组相比TH改善明显,TH阳性神经元数目增多(P<0.05)。模型组纹状体中DA水平显著低于空白组(P<0.01),针刺组和西药组纹状体中DA水平高于模型组(P<0.05),西药组和针刺组纹状体中DA水平差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 通督调神针刺可改善帕金森病模型小鼠运动症状,提高黑质纹状体中DA水平,这可能与线粒体自噬水平提高相关。
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