甘蓝型油菜植物防御素基因的克隆与原核表达

来源 :四川大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：zonglijuan

【摘要】

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根据Genbank上已知的植物防御素基因设计引物,以甘蓝型油菜中的品种'蜀杂九号'种子总RNA反转录成的cDNA为模板,进行PCR扩增,获得了243bp的片段.将该片段回收,连接到p

【作者】

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王轶罗勤吴俊郭经宇杨毅李旭锋

【机构】

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四川大学生命科学学院植物遗传实验室

【出处】

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四川大学学报(自然科学版)

【发表日期】

：

2005年4期

【关键词】

：

甘蓝型油菜植物防御素融合蛋白原核表达 Brassica Napus plant defensins fusion protein prokaryot

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根据Genbank上已知的植物防御素基因设计引物,以甘蓝型油菜中的品种'蜀杂九号'种子总RNA反转录成的cDNA为模板,进行PCR扩增,获得了243bp的片段.将该片段回收,连接到pMD18-T载体测序.将测序片段经酶切回收后克隆到GTK表达载体中,在0.1mmolIPTG诱导下表达出与理论值相符的34kD的融合蛋白条带.用GST单克隆抗体做第一抗体进行Western-blot检测,获得阳性结果.这为甘蓝型油菜植物防御素基因功能的进一步研究提供了基础.

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