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利用体外定点突变技术，缺失vvIBDV HLJ-0504株VP5基因，通过多重PCR在基因组两端分别引入锤头状核酶序列（HamRz）和丁肝病毒核酶序列（HdvRz）。将带有核酶序列的IBDV基因组插入载体pCAGGs的β肌动蛋白启动子下游，构建了IBDV感染性克隆pCAGGHLJ0504A△VP5HRT，将该感染性克隆与pCAG—GHLJ0504BHRT共转染DF—Ⅰ细胞。IFA，RT—PCR，电镜观察均显示获得重组病毒，将其命名为rHLJ0504HT△VP5。vvIBDVVP5基因缺失感染性克隆的成功构