【摘 要】
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目的 :探讨沉默人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER 2)基因对人胃癌NCI-N87细胞中三叶因子3(trefoil factor 3,TFF3)表达的影响,并探讨联合
【机 构】
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上海交通大学医学院附属新华医院肿瘤科; 海军军医大学附属长海医院肿瘤科;
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目的 :探讨沉默人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER 2)基因对人胃癌NCI-N87细胞中三叶因子3(trefoil factor 3,TFF3)表达的影响,并探讨联合抑制HER2和TFF3表达对NCI-N87细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:通过CCLE(Cancer Cell Line Encyclopedia)数据库获取38株不同胃癌细胞株中HER2与TFF3 mRNA的表达水平并分析其相关性。采用脂质体法将特异性针对HER 2基因的siRNA以及过表达质粒转染至人胃癌NCI-N87细胞中,应用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法分别检测转染HER2-siRNA和HER2过表达质粒后NCI-N87细胞中HER2 mRNA和蛋白的表达水平,以及TFF3 mRNA与蛋白表达水平的变化;采用CCK-8法和Transwell小室法分别检测单独以及联合转染HER2-siRNA和TFF3-siRNA对NCI-N87细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果:38种不同胃癌细胞株中HER2和TFF3 mRNA的表达水平呈负相关性(γ=-0.24,P=0.049);转染HER2-siRNA后,与阴性对照组相比,NCI-N87细胞中HER2 mRNA和蛋白表达水平均明显下调(P值均<0.05),而TFF3 mRNA和蛋白表达水平随之出现上调(P值均<0.05);转染HER 2基因过表达质粒后,NCI-N87细胞中HER2 mRNA和蛋白表达水平均明显上调(P值均<0.05),TFF3 mRNA和蛋白水平则呈下降的趋势,但差异无统计学意义(P值均>0.05);联合转染HER2-siRNA和TFF3-siRNA较单独转染HER2-siRNA或TFF3-siRNA能更显著地抑制NCI-N87细胞的增殖、迁移和侵袭(P值均<0.05)。结论:HER2与TFF3在不同胃癌细胞株中的表达呈负相关性;沉默HER 2基因表达能诱导NCI-N87细胞中TFF3表达水平上调;联合拮抗HER2和TFF3的表达能够协同抑制NCI-N87细胞的增殖、迁移和侵袭。
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