【摘 要】
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目的 观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)对人腹膜问皮细胞(HPMC)基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP-9及其组织抑制物(TIMP)2、TIMP-1 mRNA和Ⅰ型胶原表达的影响,同时观察TNF-α、TGF-β、I
【机 构】
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上海交通大学附属第一人民医院肾内科
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目的 观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)对人腹膜问皮细胞(HPMC)基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP-9及其组织抑制物(TIMP)2、TIMP-1 mRNA和Ⅰ型胶原表达的影响,同时观察TNF-α、TGF-β、IL-1单独或协同作用对HPMC的MMP-9活性的影响.方法 采用半定量RT-PCR法测定细胞MMP-2、MMP-9、TIMP-2及TIMP-1 mRNA的表达.采用Biotrak MMP-9活性检测系统来精确定量测定MMP-9活性及MMP-9原的含量.ELISA法检测Ⅰ型胶原蛋白的表达.结果 TNF-α(1～10 μg/L)分别刺激HPMC 4、16、24及48 h后,HPMC的MMP-9 mRNA表达显著上调,为基础的2.3～4.9倍(P＜0.05),呈时间依赖性.TNF-α(1 μ/L)作用48 h后显著下调TIMP-1、TIMP-2 mRNA表达,为基础的77.2%、61.3%(P＜0.05),而MMP-2mRNA表达没有显著变化.TNF-α+TGF-β1(1～10 μg/L)、TNF-α+TGF-β1+IL-1(1～10 μg/L和TNF-α(5～10 μg/L)刺激HPMC 24 h后,促其分泌MMP-9的作用最为明显.同时,TNF-α明显上调Ⅰ型胶原蛋白表达(P＜0.05).结论 TNF-α明显上调HPMC的MMP-9 mRNA的表达和MMP-9的活性;联合其他细胞因子后促MMP-9分泌的作用更明显.TNF-α单独或协同其他因子在腹膜纤维化的过程中可能发挥了重要作用.
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