【摘 要】
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目的·探索胆汁酸受体在抑郁模型小鼠海马中的表达变化以及可能的机制.方法,将30只4周龄C57BL/6雌性小鼠随机分为对照(control,CON)组 10只、地塞米松(dexamethasone,DEX)组 10只、慢性不可知性应激(chronic unexpected mild stress,CUMS)组10只.CUMS组每日 给予不同的CUMS;DEX组每日2次给予0.2 mg/kg的DEX灌胃给药,CON组和CUMS组每日给予等体积的羧甲基纤维素钠(溶剂)灌胃.造模持续5周,每周称重.造模结束后,各
【机 构】
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上海交通大学药学院,上海200240;上海交通大学医学院附属精神卫生中心,上海200030
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目的·探索胆汁酸受体在抑郁模型小鼠海马中的表达变化以及可能的机制.方法,将30只4周龄C57BL/6雌性小鼠随机分为对照(control,CON)组 10只、地塞米松(dexamethasone,DEX)组 10只、慢性不可知性应激(chronic unexpected mild stress,CUMS)组10只.CUMS组每日 给予不同的CUMS;DEX组每日2次给予0.2 mg/kg的DEX灌胃给药,CON组和CUMS组每日给予等体积的羧甲基纤维素钠(溶剂)灌胃.造模持续5周,每周称重.造模结束后,各组小鼠分别进行强迫游泳实验、悬尾实验和糖水偏好实验,观察小鼠的行为学变化.实验结束后处死小鼠,分离并称取小鼠海马及各脏器质量,采用Western blotting检测小鼠海马中脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)、法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR)和G蛋白偶联胆汁酸受体l(G protein-coupled bile acid receptor 1,GPBAR1,又称为 TGR5)的改变;小鼠血清胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)和成纤维细胞生长因子15(fibroblast growth factor 15,FGF15)含量使用ELISA试剂盒检测.同时使用不同浓度DEX处理大鼠胶质瘤细胞(C6)株,采用Western blotting检测细胞中FXR和TGR5蛋白水平,使用ELISA试剂盒检测C6细胞培养基中BDNF和胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF)含量,活性氧试剂盒检测细胞内氧化应激水平.用5 mmol/L N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)提前预处理C6细胞2h,观察DEX对胆汁酸受体影响的变化.结果·与CON组相比,DEX组和CUMS组糖水偏好度降低,强迫游泳实验和悬尾实验的不动时间延长(均P<0.05),胆囊系数显著升高(均P<0.05).DEX组血清FGF15水平较CON组显著升高,CUMS组则显著降低(均P<0.05);CUMS组CCK水平较CON组显著增高(P<0.05).此外,2种抑郁模型小鼠海马中TGR5蛋白表达水平显著下降,FXR显著增加(均P<0.05).C6细胞使用200 μmol/L和400 μmol/LDEX处理3d后,细胞内TGR5表达量显著减少,FXR表达量显著增加,培养基中GDNF和BDNF(BDNF仅在400 μmol/L组)水平显著降低(均P<0.05).200 μmol/L DEX可显著提高C6细胞中的活性氧水平.NAC预处理可部分逆转DEX诱导的C6细胞胆汁酸受体改变.结论·DEX和CUMS抑郁模型小鼠海马内存在相似的胆汁酸受体改变,即TGR5减少,FXR增加;该变化可能与氧化应激水平升高有关.
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