【摘 要】
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目的:探讨宫颈癌细胞中HPV16E6病毒蛋白对E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)及其介导的上皮间质转化(EMT)的影响。方法:构建HPV16E6质粒并转染至宫颈癌细胞C33A(E6-C33A组),同时设置Con
【机 构】
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武汉大学中南医院妇瘤科/肿瘤生物学行为湖北省重点实验室/湖北省肿瘤医学临床研究中心;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(编号:81272866)
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目的:探讨宫颈癌细胞中HPV16E6病毒蛋白对E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)及其介导的上皮间质转化(EMT)的影响。方法:构建HPV16E6质粒并转染至宫颈癌细胞C33A(E6-C33A组),同时设置Control-C33A组;设计合成靶向E6特异性shRNA,使Siha细胞中E6低表达(shE6-Siha组),设置Control-Siha组。划痕实验比较各组细胞迁移情况;荧光定量PCR和Western Blot检测EMT相关指标(E-cadherin、vimentin)及ZEB1的表达;生物信息学方法预测HPV16E6和ZEB1的三级结构及二者的相互作用,免疫共沉淀进行验证。结果:划痕实验显示E6-C33A组细胞迁移能力显著高于Control-C33A组;而shE6-Siha组细胞迁移能力显著低于Control-Siha组;与Control-C33A组相比,E6-C33A组中ZEB1、vimentin的表达量明显升高,E-cadherin表达则降低;与Control-Siha组相比,shE6-Siha组ZEB1、vimentin表达下降,E-cadherin表达升高。免疫共沉淀证明HPV16E6与ZEB1存在相互作用。结论:HPV16E6可促进ZEB1的表达,诱发宫颈癌细胞的EMT。
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