N~6-甲基腺苷在三氧化二砷抑制肝癌细胞生长中的作用研究

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目的探讨RNA上的N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰在三氧化二砷(Arsenic Trioxide,ATO)抑制肝癌细胞生长中的作用,为ATO抗肝癌的作用机制研究提供新思路。方法以人肝癌细胞Hep G2为研究对象,用不同浓度ATO处理细胞24 h,采用MTT实验检测细胞存活率,m6A RNA甲基化定量检测试剂盒测定RNA上的m6A修饰水平,同时用荧光定量PCR法检测m6A相关酶(METTL3/METTL14/WTAP/FTO/ALKBH5)的m RNA水平。结果随ATO浓度的增加,细胞存活率逐渐下降,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。同时,RNA上的m6 A修饰水平随ATO浓度增加而逐渐升高,在5、10和20μMATO处理组中,m6A修饰水平分别为对照组的1.81、3.11和4.08倍。此外,5、10和20μMATO处理后,3种m6A甲基转移酶(METTL3/METTL14/WTAP)的m RNA表达水平显著升高,METTL3分别为对照组的1.27、2.26和2.31倍,METTL14分别为对照组的2.38、6.95和9.07倍,WTAP分别为对照组的1.71、2.39和2.62倍;2种去甲基化酶的m RNA水平也呈增加的趋势,其中FTO分别为对照组的1.29、2.17和2.60倍,ALKBH5分别为对照组的1.29、1.63和2.13倍。结论 m6A及其相关酶在ATO抑制肝癌细胞生长中具有重要作用。
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