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豆豉是我国传统大豆发酵制品,自古以来药食两用,迄今还用于几种中药制剂中。然而豆豉后发酵阶段加入较高含量的盐分,严重影响了产品的功能性,限制了豆豉在保健领域的应用。本论文在传统豆豉生产工艺的基础上,进行富含纤溶酶的功能豆豉的生产技术研究,提高豆豉的豆豉纤溶酶以及其他功能成分的含量,并对该功能豆豉的稳定性进行了初步研究。
蒸煮黑豆接种曲霉发酵制得豆豉半成品,以该豆豉半成品为固态发酵基质,接种产豆豉纤溶酶菌株枯草芽孢杆菌DC-12,优化发酵条件,结果表明:豆豉半成品35g,葡萄糖8.0%,加水量为1.2mL/g(豆豉半成品),初始pH值7.0,接种量12%,培养温度30℃,培养84h纤溶酶活力最高。优化条件下的平均酶活力为1427IU/g(豆豉半成品),为未优化前酶活力的3.6倍。
经过曲霉和枯草芽孢杆菌DC-12两步发酵,豆豉中的多肽、氨基酸和脂肪酸含量显著增加。其中非蛋白氮、氨基酸态氮含量分别为6.06%和1.99%,比发酵前分别增加了7.0倍和5.4倍;游离脂肪酸含量达25.92(KOH mg/g),比发酵前增加了56.5倍。经过微生物的发酵,豆豉中的还原糖含量增加了50%,而水溶性总糖含量下降了63%,分别为28.45 mg/g和34.84mg/g。
分析发酵前后大豆异黄酮苷元的变化,经过曲霉发酵后,异黄酮苷元含量显著增加,大豆苷元和染料木素含量分别达285.80μg/g和182.12μg/g;枯草芽孢杆菌DC-12进一步发酵后,异黄酮苷元含量下降,大豆苷元和染料木素含量分别下降至156.12μg/g和76.18μg/g,仍比发酵前分别增加了25.0倍和15.0倍。
发酵大豆冷冻干燥得富含纤溶酶的功能豆豉冻干粉,纤溶酶酶活力为1900~2000IU/g(冻干粉),对其稳定性进行初步研究。豆豉冻干粉分别在80℃高温、92.5%相对湿度和(4500a:500)Lx光强下放置10d,相对酶活力保持在90%以上。分别经过三个月的加速试验和一年的长期试验,豆豉冻干粉中的纤溶酶酶活力均基本没有损失。豆豉冻干粉在人工模拟胃液中37℃保温2h,纤溶酶酶活力损失约50%。