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目的: 采用博莱霉素气管内注入建立大鼠肺纤维化模型,观察补肺汤治疗肺纤维化的疗效,并探讨其改善肺间质纤维化的作用机制及途经,以期在中医药领域对该病的治疗实现新的突破,并为临床治疗提供充分的理论和实验依据。 方法: SD大鼠96只,随机分为4组:正常组、模型组、补肺汤组、强的松组。正常组气管内注入生理盐水,其余3组气管内注入博莱霉素制作大鼠肺间质纤维化模型。造模后,各组分别予生理盐水、补肺汤流浸膏、强的松混悬液灌胃,1ml/100g,1次/天,周期4周,记录大鼠饮食、体重、呼吸、精神等一般情况。予造模后第7、14、28天分组分批处死大鼠。取右肺中叶行石蜡包埋、切片,苏木素—伊红染色、MASSON氏三色染色、TGF免疫组化染色,并借助计算机病理图文分析系统进行观察。取右肺剩余的肺叶制成肺组织匀浆,化学比色法测定匀浆液中氧化/抗氧化平衡系统包括SOD、GSH-PX、GSH。根据实验结果行两两比较,观察补肺汤治疗效果。 结果: (1)与模型组相比,补肺汤组、强的松组的大鼠精神状况、食欲、体重均有明显提高,肺系数明显减低,并有统计学差异(P均<0.05)。从病理看,治疗组成纤维细胞的形成、炎性细胞的浸润程度均较模型组轻。免疫组化测定肺组织切片中 TGF-β1含量模型组显著高于各治疗组(P<0.01),化学比色法测定肺组织匀浆中SOD、GSH、GSH-PX模型组显著低予各治疗组(P均<0.01)。 (2)与正常组比较,模型组及各治疗组体重、精神、食欲均有明显下降, TGF-β1明显升高(P<0.05)、抗氧化系统各组分均有明显下降(P均<0.05)。(3)补肺汤组与强的松组间,TGF-β1、GSH、SOD补肺汤组数值上高于强的松组,GSH-PX数值上接近,但均无统计学差异(P均>0.05)。 结论: 1、从肺组织的病理改变及大鼠一般情况的变化说明此次试验通过气管注入BLM的方法获得的肺纤维化大鼠模型是成功的。 2、通过对试验大鼠TGF染色的观察及TGF-β1的定量分析,表明渗出的炎症细胞,肺泡内的巨噬细胞、成纤维细胞,及肺内的毛细血管内皮细胞TGF-β1表达最强,表明是分泌TGF-β1的最主要的细胞,其表达随时间推移呈递减趋势,而胶原纤维面积逐渐增加,在第28天时达高峰。 3、肺纤维化发病机理中氧化—抗氧化失衡在其病理过程中起一定的作用,GSH-PX、GSH在细胞清除 ROS过程中发挥关键作用,尤其在肺纤维化早期炎症阶段大量耗竭;SOD活力在纤维化阶段有所变化,推测在成纤维细胞过度增殖并分泌大量胶原的过程中,SOD可能发挥一定抑制作用。 4、补肺汤可直接或间接地抑制博莱霉素诱导的肺纤维化大鼠体内TGF-β1的过度表达,改善肺纤维化时肺脏的氧化应激状态,提高肺脏抗氧化能力,并显著减少 BLM引起的肺脏胶原沉积。