以HMG-CoA还原酶序列比对和结构比较为基础的生态友好杀虫剂的设计与生物活性

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农药作为一种能有效控制作物病、虫、草害的植物保护工具,每年可为全世界挽回农作物总产量损失35%左右,挽回的经济损失高达3000亿美元。但是传统的杀虫剂会带来残留,对环境的污染,对生态的负面影响,对哺乳动物、天敌和非靶标生物等的伤害。因此发现绿色生态的新杀虫剂靶标和新杀虫剂结构就显得尤为重要。HMG-CoA还原酶抑制剂作为一种他汀类药物已经在医药领域研究有了三十多年的历史。众多研究表明,HMG-CoA还原酶不仅存在于哺乳动物体内,还广泛存在于昆虫等其它动物、植物和细菌体内。本文首先运用序列比对、同源建模、分子对接等方法对五种杀虫剂靶标(γ-氨基丁酸受体、乙酰胆碱受体、乙酰胆碱酯酶、鱼尼丁受体、钠离子通道)进行研究,建立了一套预测和评估生态安全性候选杀虫剂靶标的方法。然后利用该方法对JH生物合成途径中两种比较主要的酶HMGS和HMGR进行了预测和评估。结果表明,HMGR可能是生态友好型杀虫剂的候选靶标。再对HMGR是否为生态安全性靶标作进一步的实验验证。用已经商品化的HMGR抑制剂即他汀类化合物(氟伐他汀、匹伐他汀和洛伐他汀)对M.sexta、A.mellifera 和 D.punctata进行离体活性实验,结果显示这三类他汀类化合物对M.sexta JH生物合成具有显著的抑制作用,对D.punctata有一定的抑制作用,而对A.mellifera的影响微乎其微。然后我们设计了一系列偕二氟取代的他汀类化合物,并对这些化合物进行了生物活性测试。结果表明,这些化合物大部分对M.sexta的JH合成具有抑制作用,其中化合物1-7的活性最高,表明以偕二氟结构修饰的HMGR抑制剂类似物的思路是正确的。之后分别用化合物1-7、氟伐他汀、匹伐他汀和洛伐他汀对M.sexta幼虫和卵进行胃毒、触杀和杀卵实验。结果表明,他汀类化合物以及类似物无触杀活性,而胃毒和杀卵是该类药剂重要的毒杀方式。本文还建立了一种利用GC-MS/MS方法检测昆虫体外合成保幼激素的方法。结果表明每个样品中加入1个咽侧体,30℃,避光培养6h所得到的JH浓度较大,标准差最小。
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