金花茶水提取物对人胃癌MGC-803细胞增殖和周期的影响

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:chunyi19871225
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目的1、研究不同浓度的金花茶水提取物对人胃癌MGC-803细胞增殖影响;2、观察在不同浓度的金花茶水提取物作用下人胃癌MGC-803细胞形态和数量的改变;3、研究不同浓度的金花茶水提取物诱导人胃癌MGC-803细胞的凋亡作用及其对细胞周期的影响。方法1、用含10%胎牛血清的RPMI1640培养液体外培养人胃癌MGC-803细胞,每天用血球计数板计数,绘制细胞生长曲线并计算人胃癌MGC-803细胞群体倍增时间;2、采用MTT法测不同浓度(500μg/ml、600μg/ml、700μg/ml、800μg/ml、900μg/ml、1000μg/ml、1100μg/ml、1200μg/ml)的金花茶水提取物对体外培养人胃癌MGC-803细胞24h、48h、72h增殖抑制率,并计算24h、48h、72h金花茶水提取物半数抑制浓度;3、使用倒置显微镜观察不同浓度(600}ig/ml、800μg/ml、1000μg/ml)的金花茶水提取物作用下对人胃癌MGC-803细胞形态和数量的影响并照相;4、用AO-EB荧光染色剂染色后在荧光显微镜下观察不同浓度(600μ/ml、800μg/ml、1000μg/ml)的金花茶水提取物作用后人胃癌MGC-803细胞形态并照相;5、应用流式细胞技术(FCM)分析不同浓度(600μg/ml、800μg/ml、1000μg/ml)的金花茶水提取物作用下对人胃癌MGC-803细胞凋亡率和周期的影响。结果1、人胃癌MGC-803细胞生长曲线图呈“倒S”型,MGC-803细胞群体倍增时间TD=20h,对数生长期为20h-144h;2、MTT结果示不同浓度(500μg/ml、600μg/ml、700μg/ml、800μg/ml、900μg/ml、1000μg/ml、1100μg/ml、1200μg/ml)金花茶水提取物对人胃癌MGC-803细胞的增殖均有抑制作用,并且与剂量呈量效关系,金花茶水提取物作用的最佳时间为48h;24h、48h、72h的ICso分别为(912.33±12.70) μg/ml、(789.67±10.69)μg/ml、(746.00±6.08)μg/ml;3、通过倒置显微镜观察,与对照组相比,不同浓度(600μg/ml、800μg/ml、1000μg/ml)金花茶水提取物作用MGC-803细胞48h后,单个或小片细胞由多边形逐渐向长梭形或椭圆形发展,细胞皱缩变圆,折光性差,细胞间隙变宽,生长密度变小,逐渐由贴壁状态变为悬浮状态,浓度越大细胞形态改变越明显,贴壁细胞数量也随着药物浓度增加而逐渐减少;4、通过荧光显微镜观察,不同浓度(600μg/ml、800μg/ml、1000μg/ml)金花茶水提取物作用MGC-803细胞48h后,细胞形状变得不规则,核质体呈绿色或橙色,染色质浓缩,细胞核碎裂成点状,大小不一,可见胞质芽状突起,随着金花茶水提取物浓度的升高,还可见核质体被均匀染成橙黄色的坏死细胞;5、流式细胞术示随着金花茶水提取物浓度的升高人胃癌MGC-803细胞凋亡率明显增多,呈剂量依赖性,并引起细胞周期改变,S+G2期比例均明显增高。结论金花茶水提取物能够抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖,与剂量呈量效关系,作用的最佳时间为48h,并诱导细胞凋亡,也呈剂量依赖关系,其机制可能是将人胃癌MGC-803细胞阻滞于S+G2期从而抑制细胞生长。
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