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目的: 运用RNAi技术沉默人鼻咽癌细胞株CNE-2及CNE-1内eIF4E（eukaryoticinitiation factor4E真核细胞翻译起始因子4E）的转录表达，研究EIF4E基因对人鼻咽癌细胞增殖、细胞周期、凋亡及对化疗药物敏感性的影响，探讨eIF4E在鼻咽癌中过表达对鼻咽癌发生发展的重要意义的新机制，为进一步研究鼻咽癌的诊断和治疗的新靶点提供实验依据。 方法: 1免疫组织化学方法检测15例鼻咽粘膜慢性炎，64例鼻咽癌病例标本中eIF4E，c-myc，MMP9的表达情况。 2用RT-PCR检测SI细胞（稳定干扰EIF4E基因细胞株CNE-2）与NC细胞（稳定干扰阴性对照组CNE-2细胞）eIF4E的mRNA表达水平，免疫细胞化学方法检测两者eIF4E蛋白表达水平。 3采用CCK8法、流式细胞术分别检测CNE-2细胞增殖及药物敏感性、细胞周期及凋亡。 4通过脂质体法将FAM标记的阴性对照siRNA转染CNE-1细胞评价转染效率。 5将高效EIF4EsiRNA片段转染到人鼻咽癌CNE-1细胞后，分别运用RT-PCR法及免疫细胞化学法检测eIF4E mRNA及eIF4E蛋白的表达情况。 6采用CCK8法，流式细胞术分别检测eIF4E基因表达的改变对人鼻咽癌CNE-1细胞增殖及药敏实验、细胞周期的影响。 结果: 1在15例鼻咽慢性炎，64例鼻咽癌中，eIF4E的阳性表达率分别是7.69％(1/13)，85.71％(48/56); c-myc的阳性表达率分别为11.11％(1/9)，70.97％(22/31);MMP9的阳性表达率分别为20％(3/15)，84.31％(43/51); eIF4E与c-myc、MMP9的表达呈正相关，相关系数分别是0.55(P＜0.01)，0.58(P＜0.01)，c-myc与MMP9的表达呈正相关，相关系数是0.65(P＜0.01)。 2稳定干扰EIF4E CNE-2细胞在培养24h后对eIF4E mRNA的表达抑制率最高，为76％; eIF4E蛋白表达降为37.67％与其mRNA的表达水平相符。 3稳定干扰EIF4E基因的CNE-2细胞增殖活性在培养24h后与48h后降低最明显，与阴性对照组相比，培养24h后的增殖抑制率分别为41.05％和2.31％;48h后的增殖抑制率分别为30.36％和15.01％;细胞周期72h变化最明显，G0/G1期细胞比例增高为53.65％，S期细胞比例降低为36.29％，细胞凋亡率增加为4.32％，与对照组相比，SI细胞的抑制率明显增加。 4 CCK8法结合IC50软件计算出CNE-2细胞对顺铂的IC50为22μg/ml，NC组细胞与SI组细胞联合顺铂浓度7μg/ml、10μg/ml、22μg/ml同步化培养48h后的抑制率分别为5.24％、9.43％;2.42％、21.10％;55.81％、75.62％;同步化培养72h后的抑制率分别为5.10％、4.30％;10.85％、15.90％;78.02％、83.70％，抑制率明显增高。 5用FAM-NControl siRNA干扰CNE-1细胞，转染6h后的细胞在荧光显微镜下观察并用流式细胞仪检测荧光细胞数显示转染效率为90％; siRNA干扰CNE-1细胞24h后对eIF4E mRNA的抑制率为50％; eIF4E蛋白表达水平为40.67％，与mRNA表达水平相符。 6 CCK8法检测转染eIF4EsiRNA24h后CNE-1细胞的增殖，与NC组相比，转染48h、72h后抑制CNE-1细胞的增殖，48h抑制率为50％，抑制效果最明显。 7 CCK8法结合IC50软件计算出CNE-1细胞对顺铂的IC50为15μg/ml，CNE-1细胞转染EIF4E siRNA联合顺铂三个浓度7μg/ml、10μg/ml、22μg/ml共同培养48h后抑制率分别为-10.86％、14.90％;18.89％、51.57％;84.31％、84.05％;培养72h后抑制率为27.32％、40.140％;69.65％、78.69％;89.75％、99.18％，抑制率明显增加。 8 CNE-1细胞转染siRNA24h后，流式细胞仪结果显示与NC组细胞相比，72h变化最明显，细胞G0/G1期比例明显增加为64.04％，S期比例明显减少为22.72％。 结论: 1 eIF4E、c-myc、MMP9的表达在鼻咽癌组织中显著升高，表明eIF4E、c-myc、MMP9的表达与鼻咽癌的发生发展密切相关。 2在鼻咽癌组织中eIF4E的表达与c-myc和MMP9表达呈正相关，因而在组织水平推测推测eIF4E通过增强c-myc，MMP9的翻译表达促进鼻咽癌的发生发展。3 RNAi能明显抑制人鼻咽癌CNE-2及CNE-1细胞的增殖，使人鼻咽癌CNE-2、CNE-1细胞周期阻滞于G0/G1期，S期细胞分布比例降低;稳定干扰人鼻咽癌CNE-2细胞株在长时间培养后可以诱导出细胞凋亡;沉默EIF4E基因，可以增强鼻咽癌细胞对顺铂的药物敏感性，因此在细胞水平进一步证实eIF4E通过促进鼻咽癌细胞的增殖和细胞周期进展及抑制凋亡来促进鼻咽癌的发生发展。