目的:本研究以L5脊神经结扎(SNL)神经病理性疼痛的大鼠模型为研究对象,从行为学检测和分子生物学检测观察分析推拿对SNL大鼠的镇痛作用,以2型囊泡膜谷氨酸转运体(VGLUT2)在外周痛觉信息传递中的分子机制及其变化,探究推拿的镇痛效应机制。通过本次研究,为临床上慢性神经病理性疼痛的治疗提供一种安全有效、操作简单的方法,也为推拿镇痛的进一步研究提供科学依据和理论基础。方法:将72只雄性SD大鼠进行两次随机分组,第一次分为正常组16只、假手术组16只、模型组40只,模型组通过L5脊神经结扎建立SNL模型,造模7天后,每组随机选择8只进行行为学检测及取材;进行第二次随机分组,将32只模型组大鼠随机分为模型组8只、慢病毒注射组8只、假推拿组8只、枢经推拿组8只。对慢性病毒注射组大鼠脊髓内注入使VGLUT2下调的慢病毒颗粒,仅注射1次;对假推拿组大鼠轻轻抚摸背部18min,每天1次,共干预10天;对枢经推拿组大鼠采用按摩推拿手法模拟仪依次刺激双侧足少阳胆经上的环跳、风市、阳陵泉三穴,手法模拟为点按法、拨法、揉法,每法每穴1min,共干预10天,干预结束后进行行为学检测及取材。通过热痛觉阈值测定、机械痛阈值测定观察各组痛觉过敏情况;通过斜板实验评价各组大鼠的运动功能情况;采用免疫组化和Western blot法检测脊髓腰膨大节段中VGLUT2蛋白的表达水平。结果:1.大鼠体重变化结果:造模7天后,正常组、假手术组与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.05),正常组、假手术组差异无统计学意义(P>0.05);干预10天后,正常组和假手术组差异无统计学意义(P>0.05);正常组、假手术组与模型组、慢性病毒注射组、假推拿组、枢经推拿组比较差异具有统计学意义(P<0.05);慢性病毒注射组、假推拿组、枢经推拿组大鼠体重差异无统计学意义(P>0.05),与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。2.热痛觉阈值测定结果:造模7天后,正常组与假手术组相比较差异无统计学意义(P>0.05);正常组和假手术组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);干预10天后,正常组、假手术组、慢性病毒注射组、枢经推拿组比较差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),模型组与假推拿组比较差异无统计学意义(P>0.05)。3.机械痛觉阈值测定结果:造模7天后,正常组与假手术组相比较差异无统计学意义(P>0.05);正常组和假手术组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。干预10天后,正常组、假手术组、慢性病毒注射组、枢经推拿组比较差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),模型组与假推拿组比较差异无统计学意义(P>0.05)。4.斜板实验结果:造模7天后,假手术组与模型组相比较差异无统计学意义(P>0.05);假手术组、模型组与正常组相比较差异有统计学意义(P<0.05)。干预10天后,斜板实验测定数据显示,正常组、假手术组、模型组、慢性病毒注射组、假推拿组、枢经推拿组相比较差异无统计学意义(P>0.05)。5.免疫组化检测结果:造模7天后,正常组弱阳性(±)占比12.5%,阳性(+)占比87.5%;假手术组阳性(++)占比62.5%,强阳性(+++)占比37.5%;模型组强阳性(+++)占比100%。干预10天后,正常组阳性(+)占比100%;假手术组阳性(+)占比87.5%,阳性(++)占比12.5%;模型组强阳性(+++)占比100%;慢性病毒注射组弱阳性(±)占比75%,阳性(+)占比25%;假推拿组阳性(+++)占比100%;枢经推拿组阳性(+)占比100%。6.Western blot检测结果:造模7天后,假手术组与正常组相比较差异有统计学意义(P<0.05),假手术组与模型组比较比较差异有统计学意义(P<0.05),模型组与正常组相比较差异有统计学意义(P<0.05);干预10天后,正常组、假手术组、枢经推拿组相比较差异无统计学意义(P>0.05),模型组与假推拿组相比较差异无统计学意义(P>0.05),正常组、假手术组、枢经推拿组与慢性病毒注射组相比较差异有统计学意义(P<0.05),正常组、假手术组、枢经推拿组与模型组、假推拿组相比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.SNL造模不会对大鼠的运动功能产生影响,枢经推拿可以促进SNL大鼠的热痛阈、机械痛阈的恢复,提示枢经推拿可以改善SNL大鼠的感觉功能。2.皮肤、肌肉组织损伤疼痛和神经损伤疼痛都会引起VGLUT2表达上升,通过靶向下调大鼠脊髓神经元内的VGLUT2表达,能够改善大鼠的疼痛外观状态,能够恢复大鼠的热痛觉阈值、机械痛觉阈值至正常组水平。3.枢经推拿可下调VGLUT2的表达,进而调节脊髓内突触终末神经活性物质谷氨酸的释放,抑制疼痛信息传递,可能是枢经推拿镇痛的起效机制之一。