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糖链分布于细胞及生物大分子表面,它们在复杂多细胞生物的发展过程中调节着细胞与细胞、细胞与基质、细胞与分子之间的相互作用,在不同的生物体之间也起着重要的作用。此外,细胞核与细胞质中也存在着丰富的糖链。因此,糖链是细胞生物学中不可缺少的一部分。已有研究发现多种肿瘤的诊断标志物和治疗靶点均为糖蛋白,糖链的相关研究可以为肿瘤的诊断、治疗以及预后提供参考依据和理论基础。O-连接糖链是一种常见的蛋白质糖基化修饰,在癌症的发生发展过程中常伴随异常O-糖基化。为了研究O-连接糖链在肿瘤的发生和发展过程中的表达差异,本文建立了一种基于超滤膜辅助(FASP)解离并富集糖蛋白上全O-连接糖链的方法,并利用此方法对5株具有不同转移潜力的膀胱细胞和低氧诱导前后肺癌细胞A549中O-连接糖链进行定性分析,共鉴定到90种O-连接糖链,其中9种糖链在HCV29细胞中特异性表达;20种糖链在KK47细胞中特异性表达;2种糖链在YTS-1细胞中特异性表达;3种糖链在T24细胞中特异性表达;12种糖链在J82细胞中特异性表达。利用该方法对低氧诱导前后肺癌细胞A549中O-连接糖链也进行了定性分析,共鉴定到45种O-连接糖链。在常氧及低氧条件培养的A549细胞中分别鉴定到39种和29种特异性O-连接糖链,其中15种糖链在常氧条件下特异性表达,5种糖链在低氧条件下特异性表达。23种糖链在常氧及低氧条件培养的A549细胞中均可鉴定到,但糖链丰度存在差异。11种糖链在低氧条件培养后表达下调,10种糖链在低氧条件培养后表达上调。为了更加准确的研究糖链的表达差异,本文利用麦芽六糖作为内标糖链,对常氧及低氧条件培养的肺癌细胞A549中的O-连接糖链进行定量分析。利用质谱分析共鉴定到44种O-连接糖链,其中21种糖链在常氧与低氧条件下均可鉴定到,并以内标糖链质谱峰的离子强度进行定量比较,发现低氧诱导后21种糖链表达存在明显差异。综上所述,在所鉴定到的糖链中,发生显著变化的糖链结构多为唾液酸化、岩藻糖基化的O-连接糖链,这说明与唾液酸化糖链及岩藻糖化糖链合成、降解相关的生物过程发生异常并与肿瘤的的发生、发展与恶化密切相关。本研究以期从糖组学水平上寻找到肿瘤特征性糖链,并为深入研究O-连接糖链与肿瘤发展发展之间的分子机制提供前期基础。