【摘 要】
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本论文研究内容是水牛SRY基因和胚胎性别鉴定PCR体系的建立和优化。论文共分为两部分：第一部分，包括第一章和第二章，为文献综述部分；第二部分，包括第三章和第四章，为试验研究部分。
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本论文研究内容是水牛SRY基因和胚胎性别鉴定PCR体系的建立和优化。论文共分为两部分：第一部分，包括第一章和第二章，为文献综述部分；第二部分，包括第三章和第四章，为试验研究部分。 第三章研究目的是通过对水牛SRY基因的克隆、序列分析及Southern杂交检测，为进一步研究SRY基因的作用机理和设计特异于水牛SRY基因的胚胎性别鉴定引物打下基础。根据荷斯坦牛SRY基因设计一对引物，PCR扩增后得到水牛SRY基因，测序后分析表明，该基因长度为2005bp，其中1～504bp为5’启动子区(Promoter)，1196～2005bp为3’侧翼序列(UTR)，505～1195bp为SRY的读码框(ORF)。将该基因序列提交到GenBank数据库(登录号为DQ 417872)。BLAST比对显示，与牛属动物的同源性为95％～96％，其中HMG-box区的同源性高达99％，具有高度的进化保守性。使用ClustalX对水牛SRY基因外显子区域做多重比对分析后，构建部分哺乳动物系统进化树，与实际进化关系保持很好的一致。在SRY基因保守区设计探针，分别对雄性水牛和雌性水牛基因组进行Southern杂交，只在雄性水牛出现杂交信号，说明SRY基因为雄性特异。 第四章研究目的是建立并优化水牛胚胎性别鉴定的PCR体系，以便该项技术能在生产中大规模应用。根据第三章中水牛SRY基因核心序列设计两对特异于水牛的性别鉴定引物SA1／SA2、SB1／SB2，根据小鼠ZFX／ZFY基因和水牛G3PDH基因分别设计内参引物ZA1／ZA2、GA1／GA2。对不同
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