研究目的神经退行性疾病和很多机制有联系，但是没有特定的机制显示出是主要的机制。很显然，任何具有神经保护作用、针对特定疾病的药物，在受试者显示出有效之前都是不确定的。在此研究中，我们采用了细胞活性检测法、流式细胞仪检测细胞凋亡和坏死的方法、线粒体膜电位方法筛选虎杖乙酸乙酯部位是否对H₂O₂诱导PC12细胞损伤有保护作用及存在的机制。研究方法1．建立H₂O₂诱导的PC12细胞损伤模型2．MTT法检测不同浓度的虎杖乙酸乙酯部位对PC12细胞存活率的影响3．LDH、MTT法测定虎杖乙酸乙酯部位对H₂O₂诱导的PC12细胞损伤的影响4．流式细胞仪检测虎杖乙酸乙酯部位对H₂O₂诱导的PC12细胞线粒体膜电位的影响5．Annexin V／PI法检测虎杖乙酸乙酯部位对H₂O₂诱导的PC12细胞凋亡和坏死率的影响6．荧光倒置显微镜观察虎杖乙酸乙酯部位对H₂O₂诱导的PC12细胞凋亡的影响7．流式细胞仪检测虎杖乙酸乙酯部位对H₂O₂诱导的PC12细胞周期的影响8．用MTT,LDH法对虎杖乙酸乙酯部位其它单体对H₂O₂诱导的PC12损伤的保护作用研究研究结果1．采用浓度为880μM的H₂O₂诱导PC12细胞损伤模型。2．MTT法结果显示浓度为0．15-5μg／ml对细胞无毒性。3．LDH法、MTT法结果显示EAPC在浓度为0．31-5μg／mlN以增强细胞存活率，降低LDH的释放。4．浓度为3,1,0．3μg／ml的虎杖乙酸乙酯部位可以降低PC12细胞线粒体膜电位的去极化。5．EAPC（3μg／ml、1μg／ml、0．3μg／ml）减少了PS外翻，降低了细胞凋亡率和坏死率。6．采用Honchest 33324染色，用荧光显微镜观察细胞凋亡过程中细胞核的改变的结果显示：EAPC（3μg／ml、1μg/ml、0．3μg／ml）减少了核固缩。7．EAPC（3μg／ml、1μg／ml、0．3μg／ml）抑制了细胞S期。S期与880μM的H₂O₂组相比，有统计学意义。8．从虎杖乙酸乙酯部位分离的单体，虎杖苷、2-甲氧基-6-乙酰基-7-甲基胡桃醌、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-8-β-D-葡萄糖苷初筛后对880μM的H₂O₂诱导PC12细胞损伤有保护作用。研究结论虎杖乙酸乙酯部位在浓度为3μg／ml、1μg／ml、0．3μg／ml可以降低H₂O₂诱导的PC12细胞膜电位的下降，减少PS外翻；降低细胞凋亡率和坏坏死率，减少细胞核固缩，。通过抑制H₂O₂诱导细胞损伤而达到对PC12细胞的保护作用。