阿特拉津量子点标记免疫层析试纸条的研制

来源 :天津科技大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:dvluxiang
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本文将量子点做为荧光标记材料,研制出了阿特拉津量子点标记荧光免疫检测试纸条以及阿特拉津量子点标记荧光猝灭免疫检测试纸条,该方法可用于实际样品中阿特拉津的快速检测。利用活化酯的方法成功制备了阿特拉津包被原(Atrazine-OVA)。阿特拉津量子点标记荧光免疫检测试纸条的最佳工作条件为:量子点标记抗体的最适反应pH值为8.4;量子点(QDs)与活化剂(EDC)与抗体的摩尔比为1:3000:8;包被原的稀释倍数为1:3;二抗的稀释倍数为1:280;标准品稀释液为PBS(pH 7.4);工作液添加量为1.0μL;硝酸纤维素膜型号为MiliporeHF135s;QDs-Ab偶联物添加量为0.5μL。本研究所建立试纸条的方法检测限为0.5 ngmL-1,检测时间为10min。实际样品中水样检测限为0.5ngmL-1;甘蔗汁样品检测限为2.5ngmL-1;玉米样品检测限为5ngg-1。并且该方法与其他三嗪类除草剂中的扑灭津有较大的交叉反应,可同时检测阿特拉津和扑灭津。阿特拉津量子点标记荧光猝灭免疫检测试纸条的最佳工作条件为:量子点标记OVA偶联反应的最佳pH值为8.4;量子点(QDs)与活化剂(EDC)与OVA的摩尔比为1:3000:20;制备金标抗体的最佳蛋白添加量为10 μL;金标记抗体的最佳添加量为5μL;检测线上包被原的稀释比例为1:7.5;质控线和检测线上QDs-OVA与PBS的混合比例为1:5;样品稀释液为PBS(pH=7.4);硝酸纤维素膜型号为MiliporeHF 135s。该方法检测限为0.1 ngmL-1,检测时间为10min;实际样品中水样检测限为0.1 ngmL-1;甘蔗汁样品检测限为0.5 ng mL-1;玉米样品检测限为1ngg-1。并且该方法与其他三嗪类除草剂中的扑灭津有较大的交叉反应,可同时检测阿特拉津和扑灭津。本研究当中所建立的阿特拉津量子点标记免疫检测试纸条样品的前处理简单、操作简便、检测时间短、特异性好,比传统的胶体金试纸条灵敏度更高,能够适用于大量样品的现场快速检测。
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