论文部分内容阅读
目的本课题旨在研究三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)基因启动子区甲基化水平与冠状动脉粥样硬化性心脏病(Coronary atherosclerotic heart disease,CHD)的关系,以探讨对我国冠心病发病有重要影响的候选基因。方法1.随机入选2019年1月-2020年1月期间在福建省立医院心内一科住院治疗并经冠脉造影确诊的50例冠心病患者为病例组(冠心病组),另取同一时期在我院就诊并通过冠状动脉造影或冠状动脉CT血管成像(Coronary CT Angiography,CTA)排除冠心病的患者30名收入对照组(正常组)。采集其全血标本并提取DNA,通过实时荧光定量甲基化特异性PCR(Methylation specific real-time quantitative polymerase chain reaction,q MSP)法对目的基因启动子区甲基化水平进行相对定量。2.收集研究对象的一般资料,包括姓名、性别、年龄、BMI、饮酒史、吸烟史等。并由本院检验科测定空腹血浆葡萄糖(Fasting Blood Glucose,FBG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein Cholesterol,HDL-C)、总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、血清甘油三酯(Triglyceride,TG)等相关指标。3.DNA甲基化水平采用甲基化指数MI表示。MI=甲基化拷贝数M/(甲基化拷贝数M+未甲基化拷贝数U)*100%,M/U=2-△Ct,△Ct=△Ct=Ct甲基化-Ct未甲基化。结果1.在两组间吸烟率、饮酒率、高血压患病率、糖尿病患病率、糖化血红蛋白、空腹血糖、HDL-C及ApoA具有显著的差异性(P<0.05),其中除HDL-C及ApoA外,其余指标CHD组均高于正常组。2.ABCA1基因启动子区域甲基化水平在冠心病(CHD)组中高于正常组,且有统计学意义(P<0.05)。性别分层分析发现,无论男性还是女性人群中,ABCA1基因启动子区域甲基化水平在CHD组中均高于正常组,女性有统计学意义(P<0.05),男性无统计学意义。年龄分层分析发现,无论在年龄≥65岁的人群中还是年龄<65岁的人群中,ABCA1基因启动子区域甲基化水平在CHD组中均高于正常组,年龄<65岁的人群中有统计学意义(P<0.05),年龄≥65岁的人群中无统计学意义。3.ABCA1基因启动子区甲基化水平是冠心病的危险因素(OR=1.087,95%CI:1.010~1.170),但非冠心病的独立危险因素。4.外周血ABCA1启动子区甲基化水平与ApoB水平呈正相关(rs=0.249,P<0.05)。在CHD患者中,ABCA1甲基化水平与TC、LDL-C、ApoB水平呈正相关(TC,rs=0.294,P<0.05;LDL-C,rs=0.284,P<0.05;ApoB,rs=0.365,P<0.01)。在男性CHD患者中,ABCA1甲基化水平与TC、LDL-C、ApoB水平呈正相关(TC,rs=0.341,P<0.05;LDL-C,rs=0.325,P<0.05;ApoB,rs=0.398,P=0.01);在女性CHD患者中,ABCA1甲基化水平与TG水平呈正相关(TG,rs=0.845,P<0.01)。在年龄<65岁的CHD患者中,ABCA1甲基化水平与TG水平呈正相关(TG,rs=0.430,P<0.05)。在年龄≥65岁的CHD患者中,ABCA1甲基化水平与ApoB水平呈正相关(ApoB,rs=0.393,P<0.05)。5.年龄与ABCA1基因启动子区域甲基化水平呈正相关(rs=0.297,P<0.01),其中女性CHD患者强相关(rs=0.803,P<0.05)。6.CHD患者ABCA1启动子区甲基化水平与Gensini评分呈正相关(rs=0.311,P<0.05)。结论1.ABCA1基因启动子区高甲基化与高ApoB浓度和冠心病有关,且为冠心病的危险因素。2.年龄与ABCA1启动子区高甲基化相关,ABCA1基因启动子区高甲基化与冠心病之间的关系存在性别差异,在女性中显著。3.ABCA1基因启动子区甲基化水平与冠心病患者冠脉病变严重程度正相关。