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当病毒入侵机体时，宿主细胞可以识别病毒的核酸，通过产生Ⅰ型干扰素(TypeⅠ interferon，IFN-Ⅰ)和促炎因子来触发抗病毒天然免疫反应。作为一种重要的天然免疫受体，RIG-Ⅰ(Retinoic acid-inducible gene1)能够识别病毒RNA，通过其C末端解螺旋酶结构域结合RNA，随后发生构象改变并募集至线粒体附近，通过与线粒体上的MAVS（Mitochondrial antiviral signaling）相互作用而激活下游信号转导通路。MAVS的下游信号转导最终激活转录因子IRF3(Interferon regulatory factor3)和NF-κB，活化的IRF3和NF-κB入核刺激Ⅰ型干扰素和促炎因子转录，帮助宿主抵御病毒入侵。这一过程中，RIG-Ⅰ的活性需要受到严密的调控，使机体可以有效清除病原体，同时又不至于产生过强的炎症反应而对机体造成免疫损伤。那么，如何及时终止RIG-Ⅰ信号，避免产生过量的Ⅰ型干扰素以及造成自身免疫性疾病是一个需要深入研究的课题。 蛋白质的翻译后修饰(post-translational modifications，PTMs)，尤其是泛素化修饰(ubiquitination)，在RIG-Ⅰ活性的调控中发挥重要的作用。目前己报道有多种E3泛素连接酶参与调节RIG-Ⅰ信号通路。为了全面深入地认识RIG-Ⅰ信号通路及其调控机制，需要继续发现新的目前未知的负向调控因子。 在本课题的研究中，我们在病毒感染的细胞中免疫沉淀RIG-Ⅰ，通过质谱鉴定RIG-Ⅰ相互作用蛋白时，发现了一个新的E3泛素连接酶RNF122(Ring finger protein122)。RNF122含有N端的穿膜结构域和C端的RING(Really interesting new gene)结构域，RING结构域提示RNF122可能具有E3泛素连接酶活性。序列比对发现RNF122高度保守，鼠源RNF122与人源RNF122有97％的同源性。RNF122在小鼠各组织脏器中广泛表达，并高表达于免疫器官和免疫细胞中。我们的研究显示，VSV(Vesicular stomatitis virus)刺激前后RNF122与RIG-Ⅰ在腹腔巨噬细胞中均共定位于胞浆。进一步的研究发现，RNF122通过其穿膜结构域与RIG-Ⅰ的CARD(Caspase activation and recruitment domain)结构域结合，并通过RING结构域介导了CARD上第115位和第146位赖氨酸的泛素化，通过K48位连接的泛素化修饰促进RIG-Ⅰ降解，从而显著降低RIG-Ⅰ下游信号通路的活化水平。 RNF122表达缺失或敲低的巨噬细胞在感染VSV、SeV(Sendai Virus)或转染poly(I∶C)时，IFN-β的mRNA表达水平显著高于对照细胞。RNF122-/-小鼠的腹腔巨噬细胞在RNA病毒感染而非DNA病毒感染时分泌更多的Ⅰ型干扰素(IFN-α和IFN-β)、炎症因子TNF-α和IL-6。免疫印迹结果也显示RNF122表达缺失或敲低的巨噬细胞在VSV感染时IRF3和p65的活化水平显著高于对照组细胞。这些结果显示RNF122是RIG-Ⅰ信号通路特异性的负向调控因子，能够显著抑制RNA病毒感染引发的抗病毒天然免疫反应。 RNF122表达缺失的小鼠具有正常的骨髓细胞发育和巨噬细胞分化能力。当使用致死剂量的VSV感染小鼠时，RNF122-/-小鼠血清中Ⅰ型干扰素和促炎因子水平明显高于对照组小鼠，肺脏中炎性细胞浸润较少，生存时间也明显延长，表明RNF122对于RNA病毒感染所触发的Ⅰ干扰素产生与炎症发生具有抑制作用。此外，RNF122可发生自身泛素化，其蛋白表达量在病毒感染的细胞和小鼠中均明显升高，这种升高对于其反馈限制Ⅰ干扰素的过度产生、发挥免疫抑制功能具有重要意义。 综上所述，我们发现了RIG-Ⅰ相互作用蛋白RNF122可以通过K48位连接的泛素化修饰增加RIG-Ⅰ的降解，从而抑制RNA病毒感染所触发的Ⅰ干扰素的产生。RNF122的这种负向调控作用为我们理解宿主细胞抗病毒天然免疫反应与炎症的调控机制提供了新的视角。