人促卵泡激素(human follicle stimulating hormone,hFSH)是垂体前叶嗜碱性细胞合成和分泌的一种糖蛋白类促性腺激素。在不孕不育的诊断和治疗中,FSH是发挥着重要作用的一系列有生物活性的分子,在促使卵泡正常生长、成熟和性腺甾体类固醇的产生中不可缺少。对于女性来说,其主要功能是卵巢细胞和雌激素生成必需的一种生长因子、促分泌剂和细胞生长调节剂;对于男性来说,其主要功能是与黄体生成素(LH)控制的睾丸素结合,从而激活和保持正常精子的数目和质量。应用重组DNA技术生产的重组人FSH (rhFSH)具有标准化的分子量和生物学活性,避免了以前用于治疗的FSH由尿源提取在糖基结构上的差异,从而造成的FSH异构体生物活性上的差异。rhFSH还有优良的安全特性,这一点与尿源性的FSH相似,但却避免了尿源FSH给药时报道中一些病人可能出现的抗免疫反应。本研究在细胞放大培养基础上,针对糖蛋白激素的不均一性特点,进行了rhFSH的纯化工艺的实验研究。通过超滤浓缩、离子交换、亲和层析、凝胶过滤层析等五个工业化步骤获得大量的rhFSH,纯度达到95%以上,生物比活可达12000 IU/mg以上。在SDS–PAGE的电泳迁移率中显示解离集团的表观分子量大约在23kDa。rhFSH的等电点在4.0-5.2的范围内。免疫活性结果显阳性。在氧化亚基、含量测定的色谱图中,供试品主峰保留时间与对照品一致。解离亚基含量小于5%。三批原液唾液酸含量在7%左右。卵巢增重法表明rhFSH可明显刺激卵巢细胞的增长。药效学试验表明, rhFSH具有促进雌性成熟大鼠卵泡发育、诱发排卵的作用,可大大增加受孕大鼠的胚胎数。本研究不仅对rhFSH的纯化工艺进行了研究,而且为研究糖蛋白的纯化及鉴定检测提出了一些思路和方法。