论文部分内容阅读
桑叶为桑科植物桑Morus alba L.的干燥叶,味甘、苦,性寒。归肺、肝经。具有清肺润燥、舒散风热、凉血明目的功效,主要用于肺热咳嗽、风热感冒、头昏、头痛、眩晕、目赤、血热吐血。现代药理学研究表明,桑叶具有降血糖的作用,可用来预防和治疗糖尿病。本论文在课题组前期研究的基础上,考察了不同产地桑叶药材中芦丁、总黄酮和1-脱氧野尻霉素的含量。采用柱色谱和波谱技术分离鉴定了桑叶总黄酮有效部位中的主要化合物。研究了桑叶降血糖有效部位的质量标准,以及对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,为桑叶药用资源的合理利用以及开发具有降血糖功效的中药新药提供理论依据。主要研究内容和结论如下: 1、不同产地桑叶药材中芦丁、总黄酮和DNJ的含量测定。分别采用高效液相紫外检测法、紫外分光光度计法和柱前衍生化-高效液相荧光检测法测定了不同产地桑叶药材中芦丁、总黄酮和DNJ的含量。结果表明,芦丁、总黄酮和DNJ的质量比分别在0.0434~3.6627、13.2270~54.7382、0.2649~2.5339mg/g之间,新疆博乐产地的桑叶中芦丁、总黄酮含量最高,江苏泰州产地的桑叶中DNJ含量最高。不同产地桑叶中芦丁、总黄酮和DNJ的含量存在极显著差异(P<0.01)。 2、桑叶总黄酮部位化学成分研究。采用聚酰胺柱色谱、ODS反相柱以及HPLC等方法对桑叶总黄酮部位进行分离、纯化,得到5个单体化合物。通过谱学性质并结合文献鉴定出它们分别为:绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、芦丁和槲皮素。 3、桑叶降血糖有效部位对α-葡萄糖苷酶的体外抑制作用研究。采用了单因素实验对底物溶液的用量、酶液的用量和反应时间进行了优化,建立了体外抑制α-葡萄糖苷酶活性的反应体系,并研究了桑叶总黄酮和桑叶生物碱不同配比对α-葡萄糖苷酶以及淀粉酶的抑制作用。结果表明,体外抑制α-葡萄糖苷酶活性的最佳反应体系为40mg/mL的蔗糖溶液用量为0.4mL、1.6U/mL的酶液用量为0.2mL、反应时间为20min。当桑叶总黄酮和桑叶生物碱的比例达到3∶2时,其抑制率为75.2%,比阿卡波糖略高,且继续提高桑叶生物碱所占比例后抑制率基本不再增加。对淀粉酶抑制率的比较可看出,阿卡波糖对淀粉酶的抑制率明显高于其他组别。 4、桑叶降血糖有效部位质量标准研究。采用薄层色谱法,分别建立了桑叶总黄酮和桑叶生物碱有效部位的薄层鉴别方法。紫外分光光度法测定了桑叶总黄酮有效部位中总黄酮的含量,暂定总黄酮含量以芦丁计不得低于50%。柱前衍生化高效液相荧光法测定了桑叶生物碱中DNJ的含量,暂定其含量不得低于50%。对两个有效部位的干燥失重、炽灼残渣和重金属含量进行了研究,制定了相应的含量限度。