维吉尼霉素类新抗生素X-435-C产生菌X-435的多相分类研究和共培养在筛选微生物生理活性物质中的应用

来源 :中国协和医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:blueskyjandy
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本论文主要从形态特征,培养特征,生理生化特性,细胞化学组成等表型性状以及Ribotyping,DNA-DNA杂交,16S rRNA序列分析等基因型和系统发育学信息方面对维吉尼霉素类新抗生素X-435-C产生菌X-435进行多相分类研究。 菌株X-435是本所从北京地区土样中分离到的一株virginiamycin产生菌,它除了产生已报道的virginiamycin M以外,还产生新化合物X-435-C。该菌株属于典型的链霉菌,G+,好氧,不抗酸,细胞壁Ⅰ型,磷酸类脂Ⅱ型,主要醌组分为MK-9(H4,6,8:DNA G+C mol%是71%,基丝不断裂,有分支,在大多数培养基上气丝生长丰富,孢子链较长。与以往已经报道的virginiamycin类抗生素的产生菌相比较,菌株X-435比较接近于IFO13455(S.graminofaciens),IFO13074(S.pristinaespiralis),同属于灰色类群。这三株菌的孢子丝都是不规则螺旋形,孢子表面有疣状突起,但螺旋程度和孢子形状有所差异:X-435的孢子呈柱形,而IFO13074,IFO13455的孢子呈椭圆形或球形。从培养特征来看,三株菌在基丝背面颜色,气丝颜色,色素产生等方面也有较明显的差别。 菌株X-435和IFO13074,IFO13455的生理生化特性的差别并不明显。只是菌株X-435的纤维素水解呈阳性,而后两者则呈阴性。另外,在碳源利用方面,菌株X-435不利用棉子糖作为唯一的碳源,而菌株IFO13074-IFO13455则可以利用棉子糖作为其生长的唯一碳源。 以DIG标记的rRNA作为探针,对这三株菌进行Ribotyping分析。杂交结果显示,菌株X-435的带型明显不同于IFO13074和IFO13455。由此可以断定菌株X-435不同于以往所有已经报道的virginiamycin产生菌。 进一步对菌株X-435的16S rRNA进行测序分析,与GenBank,RDP中登录的链霉菌16S rRNA序列进行比较,选择其中序列相似值高于96%的30株菌作为近缘菌,构建系统发育学图谱。从图谱中发现菌株X-435与IFO12836(S.ambofaciens)和IFO12749(S.caelestis)的亲缘关系最为接近。本文最后对菌株X-435,IFO12836,IFO12749以及典型的virginiamycin产生菌IFO12827(S.virginiae)进行DNA-DNA杂交实验,结果显示菌株X-435与这三株菌的DNA同源性分别为47.5%,2.5%,0。综合上述分类研究结果,说明菌株X-435是一个新种,将其定名为Streptomyces beijingensis sp.nov。
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