芪参方对免疫性肝损伤小鼠Th1/Th2免疫平衡漂移影响的研究

来源 :南京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jimiwison
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目的:1.文献研究:检索近十年来中医治疗慢性乙型肝炎(以下简称慢乙肝)的临床研究,经过分析统计,探求本病的临床用药方面的规律。2.实验研究:观察芪参方对卡介苗(BCG)联合脂多糖(LPS)诱导的免疫性肝损伤(Immunological liver injury ILI)小鼠肝细胞损伤的保护作用及免疫调节功能的影响。  方法:1.文献研究:以《中国期刊全文数据库》(CNKI)为主库,检索年限为2005~2014年,检索词为“慢性乙型肝炎”和“中医”;建立Excel数据库,将所纳入文献的药物依照《中药学》进行分类,采用频数统计方法,进行频率计算。2.实验研究:将25只C57BL/6小鼠,随机分为正常组,BCG/LPS模型组,芪参方高、中、低剂量组。除空白组外,各组小鼠尾静脉注射BCG,并从造模之日起开始灌胃给药。11天后尾静脉注射LPS,8h后取血测定血清谷草转氨酶的(AST)和谷丙转氨酶(ALT)活性,无菌摘取肝脏和脾脏称重,计算脏器指数。肝脏HE染色行病理学检查,脾脏制备淋巴细胞悬液,经佛波酯(PMA)、离子霉素(Io)、莫能霉素刺激后,流式细胞术测定细胞因子白介素4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)在CD4+T细胞中的百分比。  结果:文献研究结果:1.补虚类药、清热类药占较高频率,分别为29.14%、17.62。其中补虚药中以补气、补阴、补血药占比例最高,清热类药则是清热解毒类、清热凉血类药物所占比例最高。2.单味中药的使用以益气健脾、疏利肝胆、活血化瘀、滋补肝肾药为主。  实验研究结果:1.造模结果评价:成功复制了ILI动物模型,动物表现为体重下降,血清ALT、AST升高,细胞因子IFN-γ下降、IL-4升高,病理出现了肝细胞肿胀、炎症细胞浸润、局部坏死,符合慢乙肝的临床特点及发病机制。该动物模型操作相对简单,死亡率低,验模型。2.芪参方对ILI小鼠肝功能、脏器指数及组织病成功率高,成本适宜,为研究慢乙肝较为合适的实理学的研究:血清生化检测结果表明,给药后脾脏指数、血清AST、ALT较模型组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),肝脏指数较明显组好转,但差异无统计学意义(P>0.05)。肝脏组织HE染色结果显示,模型组较空白组出现了不同程度的炎症细胞浸润/库普氏细胞增生,给药后较模型组病理有改善,但差异无统计学意义(P>0.05)。3.芪参方对ILI小鼠Th1/Th2的研究:结果显示空白组较模型组IFN-γ水平下降、IL-4水平升高,差异有统计学意义(P<0.05),芪参方高、中剂量组较模型组IL-4水平下降、IFN-γ水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);低剂量组较模型组差异无统计学意义(P>0.05)。  结论:文献研究结果表明临床用药的规律,也切合了本病病机上的主流观点:体虚邪恋,湿热疫毒侵袭。实验结果表明,芪参方能够明显降低转氨酶水平,改善肝细胞损伤状态,显著的保护肝细胞,可调节Th1/Th2类细胞因子的分泌水平,表明芪参方在对抗肝细胞损伤方面的作用可能与细胞因子分泌,纠正Th1/Th2平衡漂移,调节机体免疫功能相关,这一作用可能与剂量也有一定的相关性。
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