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果胶类物质广泛存在于高等植物细胞壁中，果胶酶是分解这类物质的酶。碱性果胶酶是指在碱性环境下具有较高活性的果胶酶，广泛应用于茶咖啡发酵、纺织工业、植物油提取、造纸工业及含果胶物质工业废水处理等领域，在饲料加工、植物病毒提取、诱导植物抗病性和洗涤等领域的应用也越来越受重视。
Pel-4A是Tohr.Kobayashi等首次从Bacillu.sp.no.P-4-N中克隆并在枯草芽孢杆菌中表达的一个高效果胶酶。该酶的最适温度是60℃，最适pH为11，在最适温度和最适pH条件下，该酶的活性可以高达到8100U/mg蛋白，是目前有报道的比活力最高的果胶酶。本文构建了Pel-4A的表达载体pUBllOPel-4A，并将其在枯草芽孢杆菌中表达。结果显示Pel-4A的在Bacillu.subtili.168和Bacillu.subtili.WB700中的表达量分别是0.94g/L和1.04g/L。在Bacillu.subtili.168中的表达量是Tohr.Kobayashi等报道的4.27倍。
引导分泌蛋白跨膜转运的信号肽，被剪切后在细胞膜和细胞质中被清除。有研究表明革兰氏阳性菌枯草芽孢杆菌的两个蛋白SppA和TepA，和革兰氏阴性菌大肠杆菌的SppA蛋白同源，可能参与信号肽片段的清除。为了证明SppA和TepA在枯草芽孢杆菌分泌表达中的作用，本文构建了三个改造菌株，分别是SppA过表达菌株Bacillu.subtili.168SppA、TepA过表达菌株Bacillu.subtili.168TepA和SppA和TepA双过表达菌株Bacillu.subtilis168SppATepA，并分别在改造后的菌株Bacillu.subtili.168TepA和Bacillu.subtilis168SppATepA中表达碱性果胶酶Pel-4A，结果显示其表达量较出发菌株Bacillu.subtili.168分别提高了14％和24％。