背景:急性髓系白血病(AML)是一种因髓系细胞分化异常并恶性增殖而引起的血液恶性肿瘤。超过30%的AML患者存在FLT3突变。FLT3是造血干祖细胞表面的酪氨酸激酶受体,对造血干细胞的增殖、生长及分化都起着重要作用。由于FLT3突变阳性的AML患者一般预后较差,FLT3突变的致病机理和相关靶向药物研发一直是AML治疗的研究热点。为寻找新的FLT3突变致病机制的潜在治疗靶点,我们对美国肿瘤基因组图谱数据库(TCGA)中AML病人mRNA测序芯片数据进行数据挖掘,发现在具有FLT3突变但预后相对较好的病人中,ZFYVE16基因表达显著升高。而已知ZFYVE16参与TGF-β、EGFR、BMP等多条信号通路,其中TGF-β信号通路在造血系统中对细胞的增殖和分化起着负调控的作用。当ZFYVE16过表达时,TGF-β信号通路负调控的作用增强,有可能会对FLT3激活的恶性增殖有抑制作用。因此我们推测,ZFYVE16表达增强可能在一定程度上抑制FLT3突变引起AML的疾病复发。方法:本研究通过逆转录病毒介导基因转染技术建立了ZFYVE16和FLT3-ITD共表达细胞系,研究两个基因在细胞水平的相互关系;同时构建Zfyve16基因敲除小鼠,在整体动物水平分析Zfyve16缺失对正常造血系统及白血病发病的影响。结果:(1)本研究通过共表达细胞系的增殖实验分析,发现ZFYVE16基因的过表达可以在一定程度上影响FLT3-ITD引起的细胞恶性增殖,蛋白印迹检测结果也显示ZFYVE16的表达与细胞增殖的恶性程度有关;(2)基于细胞水平上的发现,构建了Zfyve16基因敲除小鼠模型,我们发现Zfyve16在骨髓、脾脏、肝脏等多种造血组织中均有表达。(3)对Zfyve16野生型小鼠和敲除型小鼠的Pre-B细胞增殖实验及克隆形成实验分析发现,TGF-β对敲除型小鼠Pre-B细胞增殖抑制能力减弱,且敲除小鼠本身Pre-B细胞的自我更新能力削弱。(4)通过连续8个月的造血系统表型随访,我们并没有发现在稳态情况下Zfyve16敲除小鼠和野生型小鼠存在造血异常,两者在造血干细胞的数量和功能上也未见显著差异。