目的：研究细菌基序（CpG-oligodeoxynucleotide, CpG-ODN）和部分色素调节剂对鼠黑素瘤细胞B16、鼠永生化黑素细胞melan-a、正常人表皮黑素细胞（melanocyte, MC）的形态、黑素生成及炎性因子分泌的影响。定位并分离培养人毛囊内黑素细胞（human follicle melanocytes, HFM），为寻找体外刺激HFM增殖活化的CpG-ODN和药物奠定基础。　　方法：不同浓度的CpG-ODN、表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin gallate, EGCG）、氢醌（hydroquinone, HQ）、烟酰胺（nicotinamide, NAA）、α-促黑素细胞激素（α-melanocyte-stimulating hormone,α-MSH）和维生素 C磷酸酯镁（magnesium L-ascorbert-2-phosphate, AP-Mg）分别干预体外培养的3种黑素细胞，即B16、melan-a及正常人MC，作用不同时间后，倒置显微镜观察细胞形态变化；甲基噻唑基四唑（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）还原法检测细胞活性；多巴氧化法测定酪氨酸酶活性；逆转录聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR）法检测酪氨酸酶的mRNA表达；氢氧化钠（sodium hydroxide, NaOH）裂解法测黑素生成；酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）检测细胞培养上清中炎性因子即前列腺素-E2和 F2α（prostaglandin E2/F2α, PGE2/PGF2α）水平。获取胎儿头皮（畸形引产，死亡2小时内），制备冰冻切片，用黑素细胞的特异性标记，NKI/beteb和HMB-45抗体，免疫荧光染色，激光共聚焦显微镜观察摄片。胶原酶Ⅱ消化头皮，游离毛囊，0.25％胰酶/EDTA消化毛囊，制备单细胞悬液，进行培养。　　结果：（1）B16细胞：CpG-ODN干预24 h后，5μg/ml CpG-ODN促进细胞增殖；但10μg/ml组对细胞增殖无显著影响；15μg/ml组则抑制细胞增殖。干预48 h后，各浓度组细胞增殖与对照组均无显著性差异(P>0.05)。10μg/ml CpG-ODN显著增强酪氨酸酶活性和增加黑素生成(P<0.05)，其作用效果近似于25 nmol/mlα-MSH。10μg/ml CpG-ODN组上清液中PGE2含量也有所升高，但与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。（2）melan-a细胞：10μg/ml CpG-ODN作用于melan-a细胞24 h后，细胞树突数目增加，并有二级甚至三级树突出现，细胞色素化显著。（3）人表皮MC：不同浓度的CpG-ODN干预细胞24h和48h后，细胞活性无显著改变(P>0.05)。干预72h后，10μg/ml CpG-ODN能显著促进酪氨酸酶活性及黑素合成(P<0.05)，但是没有观察到酪氨酸酶 mRNA显著改变(P>0.05)； CpG-ODN干预细胞后，上清中PGE2及PGF2α的水平无显著差异(P>0.05)。此外，3 mM EGCG、0.5 mM HQ、6 mM AP-Mg与MC共同孵育72小时后，其细胞酪氨酸酶活性及黑素生成受到抑制(P<0.05)，EGCG组细胞树突出现串珠样变化；50nMα-MSH干预后，细胞形态改变较显著，酪氨酸酶活性及黑素生成显著增加。1mg/mL NAA组细胞酪氨酸酶活性无改变，黑素生成减少，细胞呈现异形化。（4）NKI/beteb主要表达在胎儿头皮的毛囊外根鞘隆突区，也见于毛球处和表皮基底部。HMB-45主要表达在毛球、毛母质和表皮基底部，外根鞘区表达则阴性。培养的毛囊细胞，绝大多数为双极细胞，增殖较快。　　结论：（1）CpG-ODN作用于MC的适宜浓度为10μg/ml，此浓度对细胞增殖无明显影响，但显著增加黑素细胞的树突数目和分级，增加酪氨酸酶活性，促进黑素生成。（2）实验浓度的色素调节剂中，EGCG、AP-Mg和NAA对酪氨酸酶活性具有轻度抑制作用，其中EGCG还显著影响树突体系中黑素体（melanosome, MS）的分布，而NAA使黑素细胞的树突异形化。潜在的作用机制有待于进一步研究。（3）毛囊的外根鞘中存在小群分布的含前黑素体的黑素细胞，而毛球中含成熟黑素体的黑素细胞，原代培养显示很强的增殖力。