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目的:通过建立大鼠舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)动物模型,获得舌黏膜癌变过程中各阶段的病变组织,检测上皮特异性粘附分子(epithelial cell adhesion molecule,Ep-CAM)的蛋白及mRNA在其中的表达变化,探讨Ep-CAM与TSCC发生发展的关系及意义,为TSCC的早期诊断与治疗提供依据。方法:(1)4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline-1-oxide,4NQO)饮水法建立大鼠TSCC模型:将84只6周龄Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠随机分为实验组A、B、C、D、E、F,对照组G,每组12只。给予实验组饮用质量分数为0.004%的4NQO溶液(纯净灭菌水配制而成,避光),给予对照组饮用纯净灭菌水。将大鼠于第12周(A)、14周(B)、16周(C)、18周(D)、20周(E)、22周(F、G)分5批处死。取舌体病变组织分为两部分,一部分于4%多聚甲醛溶液中固定,用于HE染色病理分级和免疫组织化学检测;另一部分置于含有RNAstore保存液的无酶冻存管中,于-20℃冰箱中保存,用于实时荧光定量PCR(fluorescence quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测;同时取颈部淋巴结、食管、肺及肝脏进行HE染色及病理学检查。(2)免疫组织化学法检测Ep-CAM在大鼠舌黏膜不同病变组织中的表达情况。(3)RT-qPCR法检测Ep-CAM的mRNA在大鼠舌黏膜不同病变组织中的表达情况。结果:(1)本次实验成功建立了大鼠舌鳞状细胞癌动物模型,共获得80例有效标本,按病理表现将标本分为6级:正常舌黏膜18例(22.50%)、上皮单纯增生9例(11.25%)、轻度上皮异常增生11例(13.75%)、中度上皮异常增生12例(15%)、重度上皮异常增生12例(15%)、TSCC18例(22.50%);食管、肺、肝脏、淋巴结并未见明显病变。(2)免疫组织化学法检测Ep-CAM在正常舌黏膜向TSCC发展的各阶段病变组织中Ep-CAM的阳性表达率分别为:正常舌黏膜11.11%(2/18);上皮单纯增生22.22%(2/9);轻度异常上皮增生36.37%(4/11);中度上皮异常增生66.67%(8/12);重度上皮异常增生91.67%(11/12);舌鳞状细胞癌88.89%(16/18)。其中,Ep-CAM在大鼠舌黏膜癌变过程中表达上调,各病理分级组之间的表达差异有统计学意义(P<0.05)。阳性部位主要定位于上皮细胞膜及细胞质。(3)RT-qPCR技术共检测了6组共80例标本,在大鼠舌黏膜癌变过程中,Ep-CAM mRNA表达水平上调。其中相较于正常黏膜组,上皮单纯增生组及轻度上皮增生组Ep-CAM mRNA的表达与之无差异(P>0.05),中度和重度上皮异常增生组、TSCC组Ep-CAM mRNA的表达均上调(P<0.05);相较于上皮单纯增生组,轻、中和重度上皮异常增生组、TSCC组Ep-CAM mRNA的表达上调(P<0.05);相较于轻度上皮异常增生组,中、重度上皮异常增生组、TSCC组Ep-CAM mRNA的表达上调(P<0.05)。Ep-CAM mRNA在上皮单纯增生、轻度上皮异常增生、中度上皮异常增生、重度上皮异常增生、TSCC组织中的表达量分别是正常黏膜的0.79倍,1.12倍、1.82倍、2.51倍、4.45倍。结论:(1)4NQO饮水法能够成功诱导SD大鼠舌黏膜癌变,建立TSCC动物模型,且诱导具有靶向性。(2)Ep-CAM蛋白及mRNA表达水平在大鼠舌黏膜癌变过程中一致性上调,表达水平与病理分级密切相关,在TSCC中表达水平明显异常上调,Ep-CAM mRNA表达水平变化可能是TSCC发生的早期事件。(3)Ep-CAM参与了TSCC的发生发展,可作为早期诊断TSCC的有效指标,下调Ep-CAM有望成为治疗TSCC的有效靶点。