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目的应激性高血糖时,皮质醇是主要的升糖激素。首先,收集危重症医学科应激性高血糖患者,分析高血糖患者胰岛β细胞功能状态,探讨应激性高血糖状态下的胰岛β细胞功能状态改变与皮质醇的关系。其次,采用糖皮质激素地塞米松诱导大鼠胰岛素瘤细胞（INS-1）构建细胞模型,探讨应激性高血糖时胰岛β细胞功能状态改变的分子机制。通过实验可为进一步阐明应激性高血糖胰岛β细胞功能障碍的机制提供实验依据。方法1危重症应激性高血糖患者β细胞功能和皮质醇水平分析:选取入住重症医学科的患者42例,按纳入和排除标准将患者分为应激性高血糖组30例和无高血糖组12例。便携式血糖仪检测空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白自动仪检测糖化血红蛋白（Hb A1c）。采集两组患者的血液标本,ELISA法检测空腹胰岛素（FINS）、皮质醇（Cortisol）。HOMA-β评价胰岛β细胞功能、HOMA-IR评价胰岛素抵抗。组间比较采用两独立样本的t检验,相关性分析使用Pearson相关系数。P<0.05为具有统计学意义。2大鼠胰岛素瘤INS-1细胞株依据添加不同刺激浓度的地塞米松（DXMS）将实验分为4组,正常组、低剂量组（0.01μM）、中剂量组（0.1μM）、高剂量组（1μM）;用MTT比色法检测不同浓度DXMS刺激后24、48、72h的OD值,按公式计算细胞存活率;AnnexinⅤ-PI荧光探针流式细胞术检测INS-1细胞的总凋亡率;Real-time q PCR方法检测内质网应激及去分化相关指标,GRP78、CHOP、Neur3、OCT4的m RNA表达情况;Western blot方法检测GRP78、CHOP、Neur3、OCT4的蛋白表达情况;DCFH-DA、DHE、Mito SOX荧光探针流式细胞术检测细胞和线粒体内的ROS水平;TMRE荧光探针流式细胞术检测细胞内线粒体的膜电位水平;采用Oroboros高分辨率细胞能量代谢分析系统（O2K）检测细胞内线粒体呼吸链氧化磷酸化能力是否正常。计量资料用均数±标准差描述,两组间比较采用两独立样本的t检验;相关性分析使用Pearson相关系数。多组间比较采用完全随机设计资料的方差分析,两两比较选用Dunnett’s t检验。计算结果P<0.05认为具有统计学意义。结果1自2019年9月至2021年2月,共收集42例危重症患者纳入研究,应激性高血糖组30例,对照12例。高血糖组HOMA-β指数较对照降低、皮质醇水平增高,与正常组比较具有统计学意义（P<0.05）,提示危重症应激性高血糖患者存在胰岛细胞功能障碍;Pearson相关性分析显示与皮质醇增高具有相关性。2糖皮质激素刺激胰岛细胞（INS-1）显示:MTT比色法结果与正常组比较,低、中、高剂量3组细胞存活率均降低,随着糖皮质激素的浓度增加、刺激时间越长,细胞的存活率越低（P<0.05）。AnnexinⅤ-PI检测INS-1细胞凋亡率,各组细胞的平均总凋亡率分别为0.62%、3.67%、5.51%和9.94%,差异具有统计学意义（P<0.05）。Real-time PCR数据显示,与正常组比较,CHOP水平增高、GRP78降低,Western blot进一步证实了PCR的结果,说明细胞内存在内质网应激反应;去分化相关指标未见明显变化。DCFH-DA、DHE、Mito SOX活性氧（ROS）检测,与正常组相比较,细胞内ROS水平增高（P<0.05）,且与糖皮质激素的剂量呈相关性（P<0.05）。在进行线粒体膜电位TMRE检测时发现,与正常组相比较,添加糖皮质激素的各组膜电位水平降低（P<0.05）。O2K能量代谢仪分析线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ的结果显示,添加糖皮质激素的各组与正常组比较,线粒体呼吸速率下降（P<0.05）,提示存在线粒体受损。结论1危重症应激性高血糖患者存在胰岛β细胞功能障碍,且与皮质醇水平相关。2糖皮质激素引起INS-1细胞存活率下降,并诱导了细胞凋亡。3糖皮质激素诱导INS-1细胞出现了严重的内质网应激及氧化应激,可能是胰岛β细胞凋亡原因之一。4 INS-1细胞线粒体氧化磷酸化功能下降,可能存在线粒体受损,是诱导细胞凋亡的另一原因。图14幅;表13个;参86篇。