背景:胃癌是一类高发生率、高死亡率的恶性肿瘤,高居中国癌症新发和死亡例数的第二位。近年来随着肿瘤代谢领域的发展,部分研究表明氨基酸代谢重编程可能是胃癌发生发展的重要因素,但目前关于其机制方面的研究仍相当缺乏。本研究旨在探索肿瘤相关激酶NEK8通过调节Asn代谢促进胃癌进展的机制。方法:本研究采用免疫组化、RT-PCR及Western Blot检测NEK8、ASNS及ATF4等分子在胃癌细胞及组织中的表达水平;通过细胞增殖实验、划痕愈合实验、平板克隆形成实验、Transwell侵袭及迁移实验和Ed U增殖实验检测体外细胞功能变化;通过免疫荧光及临近连接技术分析NEK8及ASNS在细胞内定位及是否存在相互结合;通过流式细胞仪检测细胞周期及凋亡的变化;通过非靶向代谢组学检测NEK8敲低后细胞内分子代谢的变化;通过免疫共沉淀及质粒分段技术分析NEK8及ASNS在细胞内是否结合及结合的具体结构域;通过质谱分析检测ASNS的磷酸化位点,并采用定向点突变阻止该位点磷酸化从而检测该位点是否为功能性磷酸化位点;最后使用裸鼠皮下成瘤技术分析磷酸化位点突变后在体内水平对胃癌细胞的影响。使用SPSS 22.0软件、Graph Pad Prism 7.0和R version 3.6.1对本研究中涉及的数据进行分析,统计学显著性水准设置为P=0.05。结果:NEK8在胃癌中表达上调且与胃癌患者预后相关,敲低或过表达NEK8可抑制或促进胃癌细胞增殖、克隆形成能力、细胞迁移及侵袭能力。流式分析提示NEK8可促进胃癌细胞周期进展并可抑制胃癌细胞凋亡。生物信息学分析结果表明NEK8可能通过调节细胞代谢通路促进胃癌进展,代谢组学分析表明NEK8可调节胃癌细胞氨基酸代谢,同时也可影响m TOCR1通路。质谱分析及WB结果表明NEK8可调节ATF4/ASNS轴的水平,进而调节Asn代谢。ATF4作为NEK8调节Asn代谢的中间分子,同样可促进胃癌细胞的增殖、侵袭及迁移,不仅如此我们也以ATF4为基础构建了相对准确的nomogram图预测胃癌预后（C指数=0.797,3年生存率的AUC=0.855,5年生存率的AUC=0.863）。机制上NEK8可以磷酸化ASNS,磷酸化位点为S349,该位点突变后可从体内及体外水平上抑制胃癌细胞的增殖。最后NEK8敲低对m TOCR1通路的抑制效应可以被外源性补充Asn所补救,提示NEK8可通过Asn调节m TOCR1通路。结论:NEK8在胃癌组织及细胞中高表达,同时可促进胃癌细胞增殖、侵袭、迁移及克隆形成等细胞功能进展,机制上NEK8可通过调节ATF4/ASNS轴及ASNS的S349磷酸化调节Asn代谢,进而调节m TORC1通路,最终导致胃癌进展。