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研究背景原发免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia,ITP)是一种获得性的自身免疫性疾病,其特征表现为孤立的血小板减少症。本病常病情迁延且容易复发,其发病机制亦尚未完全明确,为疾病的明确诊断和药物的研发带来困难。外泌体是一种小型的细胞外膜性囊泡,最近的研究揭示了其在信号传递和免疫调节方面的重要意义。研究发现外泌体可参与多种自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等的发病过程,这提示我们外泌体可能也同样参与了 ITP的发病机制。本研究针对ITP患者的血浆外泌体进行蛋白组学测定及microRNA测序分析,可以帮助我们更好的理解ITP的发病机制,并可能为将来提供新的治疗靶点。目的对比原发免疫性血小板减少症患者与健康对照者在血浆外泌体蛋白组学表达谱、microRNA测序表达谱之间存在的差异,发掘潜在发病机制及治疗靶点。方法所有研究对象均严格按照入组标准纳入本研究。对原发免疫性血小板减少症患者与健康对照者进行空腹采血并按照规范流程提取血浆外泌体。通过透射电子显微镜分析、Western Blot蛋白印迹分析、纳米颗粒示踪分析验证所提取外泌体,并与相关合作单位协同进行蛋白组学分析、microRNA测序分析,对比原发免疫性血小板减少症患者与健康对照者在血浆外泌体蛋白组学表达谱、mi croRNA测序表达谱之间存在的差异,查阅相关文献对蛋白组学、microRNA组学分析结果进行数据挖掘。结果本研究共纳入2017年10月至2018年10月期间,在山东大学齐鲁医院血液科收治8名ITP患者,其中女性6名,男性2名,年龄分布自17至56岁,中位年龄32岁。8名健康对照者参与了本实验,其中女性4名,男性4名,年龄分布自23至32岁,中位年龄24岁。我们通过透射电子显微镜分析、Western Blot蛋白印迹分析、纳米颗粒示踪分析证明所提取细胞外囊泡呈现出典型的圆形结构,直径分布在143.9±59.2nm(均值±标准差),并表达主要特征蛋白CD9、CD63和TSG101,本次实验所分离的细胞外囊泡,其观察到的形态、大小和蛋白质标记均符合外泌体的定义。我们对来自于ITP患者的血浆外泌体进行蛋白组学测定及microRNA测序分析,结果表明在ITP患者组中,存在1种表达上调的蛋白(载脂蛋白 E,ApoE),6 种表达下调的microRNA(miR-584-5p,miR-4433a-5p,miR-4433b-3p,miR-6842-3p,miR-130b-5p 和miR-222-3p),以及 10 种表达上调的 microRNA(miR-29a-3p,miR-142-5p,miR-16-2-3p,miR-29b-3p,miR-501-3p,miR-144-5p,miR-192-5p,miR-182-5p,miR-363-3p 和 miR-96-5p)。我们选取部分蛋白及microRNA进行GO分析及KEGG分析等深入数据挖掘,结果提示上述蛋白和microRNA与免疫调控密切相关,可能参与ITP发病机制,并为药物研发提供新的靶点。结论ITP患者与健康对照者在血浆外泌体蛋白组学表达谱、microRNA测序表达谱之间存在差异,这些差异蛋白、microRNA与免疫调控密切相关,为发现潜在发病机制及治疗靶点提供了新的思路。