基因沉默PD-L1对肝内胆管癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响

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目的:探讨PD-L1对肝内胆管癌(intrahepatic cholangocarcinoma,ICC)增殖、侵袭及转移的影响方法:转染有效的PD-L1基因si RAN干扰片段进入人肝内胆管癌HCCC9810细胞中,下调PD-L1的表达;(1)利用荧光定量PCR检测转染成功肝内胆管癌细胞中PD-L1基因的表达情况;(2)利用Western Blotting方法,检测转染成功肝内胆管癌细胞中PD-L1蛋白的表达情况;(3)通过MTT增殖实验观察其对肝内胆管癌细胞增殖能力的影响;(4)利用细胞划痕实验检测0h、24h、36h融合率,Transwell小室进行侵袭实验,以此来观察其对肝内胆管癌细胞迁移及侵袭能力的影。结果:1在荧光定量PCR实验中,下调PD-L1的干扰组其PD-L1基因表达量低于阴性对照组及正常对照组。2.在Western Blootting实验中,下调PD-L1的干扰组其PD-L1的蛋白表达量低于阴性对照组及正常对照组。3.在MTT增殖实验中,下调PD-L1的干扰组其细胞的增殖能力低于阴性对照组及正常对照组。4.在迁移及侵袭实验中,下调PD-L1的干扰组其迁移能力及侵袭能力均低于阴性对照组及正常对照组。结论:1.在下调PD-L1之后,肝内胆管癌细胞的增殖,迁徙,侵袭能力有这一定程度的下降;2.PD-L1可能会成为肝内胆管癌免疫治疗中的一个新的基因靶位为研制肝内胆管癌靶向抗肿瘤药物提供前期实验室基础依据。
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