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目的：钙激活氯通道(Calcium-activated Cholirde Channels, CaCC)是心肌主要的氯离子通道之一,该通道与正常心肌细胞的电活动和某些心脏疾病(如心肌梗死,心力衰竭)关系密切。本实验探讨钙激活氯通道蛋白TMEM16A在小鼠心肌组织的表达。材料和方法：1.清洁级昆明种小鼠购自青岛市药检所。成年小鼠,体重25-35mg,新生小鼠出生1-3天内使用。2.拉颈处死后迅速取出心脏,取50-100mg心肌组织以Trizol试剂提取总RNA。以提取的DNA为模板,采用RT-PCR检测心肌TMEM16A mRNA的表达。3.成年小鼠快速处死后取出100mg心肌组织,4g/L多聚甲醛(4℃)固定6-8h,转入300g/L蔗糖放置24h至沉底,做14um厚连续冷冻切片。免疫荧光法检测心肌TMEM16A蛋白的表达。4.成年小鼠取出心脏后,用RIPA裂解液裂解后提取蛋白,酶标仪测出蛋白浓度,免疫印迹法检测成年小鼠心肌组织的TMEM16A蛋白的表达。结果：1.新生及成年小鼠TMEM16A(?)的基因的扩增条带为330bp,与TMEM16AcDNA阳性对照位于同一水平,提示二者心肌均有TMEM16A mRNA的表达。差异无显著性(n=4,t=0.7698,P>0.05)。2.成年小鼠心肌切片用兔抗鼠TMEM16A抗体(一抗)处理后再加FITC标记的山羊抗兔IgG(二抗)染色,激光共聚焦显微镜下显示绿色荧光信号,WGA-TMR标记的细胞膜呈红色荧光,二者融合呈黄色。阴性对照(PBS代替一抗)未见绿色荧光,仅见红色的细胞膜。提示小鼠心肌组织存在TMEM16A蛋白的表达,且主要定位于细胞膜上。3.成年小鼠TMEM16A目的基因的扩增条带是130kb,与TMEM16A阳性对照位于同一水平,提示成年小鼠心肌组织中有TMEM16A的表达。结论：本研究利用分子生物学、免疫荧光染色技术和免疫印迹法,在小鼠心肌组织成功地检测到TMEM16A mRNA和蛋白的表达。新生小鼠和成年小鼠TMEM16A mRNA水平无明显差异,提示TMEM16A氯通道蛋白在小鼠心肌组织的生长发育过程中相对恒定。