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目的：研究丁苯酞对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞自噬相关因子的影响，探讨丁苯酞对帕金森病细胞模型的保护作用机制。 方法：将SH-SY5Y细胞株置于DMEM/F12=1:1培养基（含10％的胎牛血清），在37℃，5%CO2孵育箱中培养，等达到80%～90%汇合时传代，选取对数生长期的细胞进行实验。实验共分4组：空白对照组、MPP+组、雷帕霉素预处理+MPP+组、丁苯酞预处理+MPP+组。其中，MPP+组：待细胞达到70%~80%汇合后的3h之后，加入1mmol/L MPP+继续培养24h；雷帕霉素预处理+MPP+组：待细胞达到70%~80%汇合后加入200nmol/L雷帕霉素，作用3h后再加入1mmol/L MPP+继续培养24h；丁苯酞预处理+MPP+组：待细胞达到70%~80%汇合后向培养瓶中加入浓度为10μmol/L的丁苯酞作用3h后，再加入1mmol/L的MPP+继续培养24h。各实验组采用噻唑蓝（MTT），测定相对存活率；利用倒置荧光显微镜，观察细胞形态变化；采用Western blot印迹法，检测各组LC-3II/LC-3I、Beclin1的相对蛋白表达含量；利用RT-PCR技术，检测LC-3II/LC-3I和Beclin1基因mRNA的相对表达量。 结果：1 MTT比色法结果显示MPP+组细胞相对存活率为45.14%±6.62%，较空白对照组显著性降低（P<0.05），而给予雷帕霉素预处理+MPP+组细胞存活率为81.20%±1.66%，也较MPP+组明显增高（P<0.05），丁苯酞预处理的细胞相对存活率较MPP+组明显升高（P<0.05），相对存活率为75.56%±5.46%，且雷帕霉素预处理+MPP+组和丁苯酞预处理+MPP+组的相对存活率变化趋势一致，无显著性差异（P>0.05）。2利用倒置荧光显微镜观察可见，空白对照组的细胞多是梭状或三角状，轴突清晰，树突状结构较长较多，呈网状结构分布，且贴壁状态良好；MPP+组的细胞多数胞体肿胀变圆，不再成正常细胞三角形或梭形形态，突起结构缩短或断裂，贴壁细胞减少，部分细胞碎片脱落到培养基中；经丁苯酞预处理的细胞及经雷帕霉素预处理的细胞与MPP+组相比，贴壁细胞增多，胞体和轴突较完整，胞体出现树枝样突起，细胞间的突起联系增多且细胞形态接近空白对照组。3 Western blot印迹法结果显示，MPP+组LC-3II/LC-3I蛋白相对表达量为2.315±0.232，蛋白条带较空白对照组增粗，灰度值变高（P<0.05），经雷帕霉素预处理作用后LC-3II/LC-3I蛋白表达量为3.120±0.314，与MPP+组相比显著性升高（P<0.05），丁苯酞预处理+MPP+组LC-3II/LC-3I蛋白表达量为2.802±0.232，和MPP+组相比也明显升高（P<0.05）；MPP+组Beclin1蛋白相对表达量为0.947±0.052，蛋白条带较空白对照组增，灰度值高（P<0.05），雷帕霉素预处理作用后Beclin1蛋白表达量为1.435±0.106，与MPP+组相比较升高（P<0.05），丁苯酞预处理+MPP+组Beclin1蛋白表达量为1.286±0.123，与MPP+组相比明显升高（P<0.05），且雷帕霉素预处理+MPP+组与丁苯酞预处理+MPP+组比较，LC-3II/LC-3I蛋白比值及Beclin1蛋白的表达量无显著性差异（P>0.05）。4 RT-PCR结果显示，MPP+组较空白对照组LC-3II/LC-3I基因相对mRNA表达增加（P<0.05），相对表达量为0.875±0.089，丁苯酞预处理+MPP+组及雷帕霉素预处理+MPP+组均较MPP+组LC-3II/LC-3I基因相对 mRNA量表达进一步增加（P<0.05），相对表达量分别为1.201±0.178和1.348±0.233。MPP+组和空白对照组比， Beclin1基因相对 mRNA表达量增加（P<0.05），相对表达量为0.690±0.040，经丁苯酞预处理作用后，Beclin1基因相对 mRNA表达量较MPP+组进一步增加（P<0.05）相对表达量为0.782±0.035，雷帕霉素预处理+MPP+组相较MPP+组的Beclin1基因相对 mRNA的表达量增加（P<0.05），相对表达量为0.828±0.077。雷帕霉素预处理+MPP+组与丁苯酞预处理+MPP+组比较LC-3II/LC-3I及Beclin1 mRNA的表达量均无差异（P>0.05）；该实验方法结果趋势与Western blot印迹法各组结果趋势相同。 结论：1 MPP+诱导的SH-SY5Y细胞存在自噬；给予自噬促进剂雷帕霉素后，自噬相关因子LC-3II/LC-3I、Beclin1表达进一步增加，自噬水平提高，细胞存活数量增多。2丁苯酞可以增加自噬相关因子LC-3II/LC-3I、Beclin1的表达，通过上调自噬水平，防止受损细胞发生继发性损伤来发挥神经保护作用。