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目的：①了解人胎盘滋养层细胞系Bewo细胞HBV感染与TLR3蛋白表达的关系；②探讨HBV刺激的Bewo细胞TLR3与其信号转导过程相关细胞因子表达的关系；③探讨TLR3和相关细胞因子在Bewo细胞抗HBV中的作用。方法：(1)培养人胎盘滋养层细胞系Bewo细胞,分为PolyI:C(TLR3配体)刺激组及对照组Bewo细胞,采用FAC(流式细胞技术)测定的TLR3表达；(2)采用100μl HBV DNA含量为5.0×106 (copies/ml)的血清与Bewo细胞共培养作为HBV感染方法,设立三组：空白对照组,HBV刺激组,PolyI:C+HBV刺激组。于HBV刺激8 h、16 h、24 h、48h后收集培养上清及细胞进行以下实验：①FACS测定空白对照组、HBV刺激组和PolyI::C+HBV刺激组Bewo细胞TLR3的表达以及不同刺激时间点的TLR3表达变化；②用ELISA法(酶联免疫吸附法)检测HBV刺激组和PolyI:C+HBV刺激组细胞培养液中IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-β的含量；③用FQ-PCR(荧光定量PCR)检测HBV刺激组及PolyI:C+HBV刺激组细胞培养液以及Bewo细胞中HBV DNA病毒载量。结果：①PolyI::C刺激组Bewo细胞TLR3蛋白平均荧光强度为53.58±3.11,对照组细胞为42.14±3.85,差别有统计学意义(t=-10.721,P＜0.001)。②用FAC检测HBV刺激不同的时间点(8h、16h、24h、48h) Bewo细胞的TLR3蛋白含量,表达水平在空白对照组、HBV刺激组及PolyI:C+HBV刺激组中四个不同时间点均有统计学差异(P＜0.05),对照组的Bewo细胞4个时间点内TLR3蛋白平均荧光强度分别为47.93、50.13、54.70、50.70,HBV刺激可使TLR3蛋白水平升高,在8h为59.85,16h为70.45,24h为79.18,48h为87.27,且随时间变化TLR3蛋白表达水平有升高趋势,PolyI:C+HBV刺激组TLR3蛋白量高于对照组及HBV刺激组,8h为68.67,16h为82.98,24h达到94.08,48h为79.66,24h TLR3蛋白达到高峰值。③与HBV刺激组相比,PolyI:C+HBV刺激组IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-β含量在不同的时间点(8 h、16 h、24 h、48h)表达水平均有显著性差异,且随着时间延长表达水平上升；TNF-α在与HBV共培养8h时表达量即开始上升,IL-6是在24h后升高幅度较大,IL-10的浓度在HBV感染组表现为迟缓上升,而PolyI:C+HBV感染组16h小时后上升幅度加大,IFN-β随着与HBV共培养的时间的增加呈现低幅度缓慢上升。与HBV刺激组相比,PolyI:C+HBV刺激组IL-2表达量未呈现统计学差异。④用FQ-PCR检测HBVDNA,结果显示：PolyI:C+HBV刺激组培养上清中HBV DNA含量均低于HBV刺激组,在HBV刺激8h时,两组HBV DNA含量尚未见统计学差异(t=3.635,P＞0.05),但在刺激16h之后,两组HBV DNA水平均有统计学差异(t=12.728,P＜0.05；t=7.603,P＜0.05；t=11.314,P＜0.05)。结论：①HBV刺激后Bewo细胞TLR3蛋白表达增加；PolyI:C可通过上调Bewo细胞TLR3蛋白表达来降低HBV感染与复制水平。②HBV刺激能诱导Bewo细胞分泌细胞因子IL-6、IL-10、TNF-αIFN-β, PolyI:C增强了Bewo细胞分泌细胞因子的能力,提示TLR3可能通过其信号转导途径的相关细胞因子发挥抗HBV感染的能力。③活化TLR3可降低Bewo细胞HBV的复制程度。